Construção de clones recombinantes de Bacillus subtilis por fusão dos genes CotC de endósporo e MCP (Major Capsid Protein) de isolado brasileiro de Ranavirus (2023)
- Authors:
- Autor USP: NAVARRO, JULIANA DE OLIVEIRA - FZEA
- Unidade: FZEA
- Sigla do Departamento: ZMV
- DOI: 10.11606/T.74.2023.tde-29022024-092129
- Subjects: IRIDOVIRIDAE; BACILOS GRAM-POSITIVOS; VACINAS
- Keywords: Bacillus sutilis; Ranavirus; Spore surface display
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Recombinação genética é um dos principais mecanismos que impulsionam o processo de obtenção de novas proteínas com fins biotecnológicos, podendo-se destacar a utilização de cepas recombinantes de Bacillus subtilis para a produção de vacinas baseadas em subunidades proteicas. Em termos de profilaxia, essa estratégia pode ser aplicada à prevenção contra infecções por Ranavirus, representando uma abordagem inovadora e versátil. As ranaviroses são doenças causadas por vírus do gênero Ranavirus, pertencente à família Iridovidae, que reúne patógenos emergentes capazes de infectar três classes de vertebrados: peixes ósseos, anfíbios e répteis. Surtos de ranavirose associada a estirpes de Frog virus 3 (FV3) podem apresentar alta mortalidade, causando prejuízos consideráveis na ranicultura. Nesse sentido, o presente estudo teve como objetivo a construção de clones recombinantes de Bacillus subtilis por meio da fusão gênica dos genes CotC, associado à proteína do revestimento externo do endósporo de B. subtilis, e MCP (Major Capsid Protein), que codifica a proteína principal do capsídeo, de estirpe brasileira de Ranavirus. Foram desenhados primers específicos para amplificação dos genes CotC e MCP. A amplificação do gene CotC foi obtida de uma cepa parental de Bacillus subtilis. A partir de estirpe de FV3, pertencente ao biobanco do Laboratório de Higiene Zootécnica da FZEA-USP, realizou-se a amplificação do gene MCP. Utilizou-se o produto dessas amplificações para realizar a PCR defusão, sendo confirmada por sequenciamento nucleotídico. Os produtos da PCR de fusão foram clonados no plasmídeo pDG1662 e inseridos em cepas competentes de Bacillus subtilis, sendo a confirmação dos novos clones, denominados de pDGCMCP, também confirmadas por sequenciamento nucleotídico. A obtenção de cepa recombinante de B. subtilis para MCP de ranavírus, por meio da técnica de spore surface display, utilizada no presente estudo, é etapa essencial no desenvolvimento de vacinas de nova geração contra a ranavirose
- Imprenta:
- Publisher place: Pirassununga
- Date published: 2023
- Data da defesa: 23.11.2023
- Este artigo possui versão em acesso aberto
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- Versão do Documento: Versão publicada (Published version)
-
Status: Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access) -
ABNT
NAVARRO, Juliana de Oliveira. Construção de clones recombinantes de Bacillus subtilis por fusão dos genes CotC de endósporo e MCP (Major Capsid Protein) de isolado brasileiro de Ranavirus. 2023. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2023. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29022024-092129/. Acesso em: 15 mar. 2026. -
APA
Navarro, J. de O. (2023). Construção de clones recombinantes de Bacillus subtilis por fusão dos genes CotC de endósporo e MCP (Major Capsid Protein) de isolado brasileiro de Ranavirus (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Pirassununga. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29022024-092129/ -
NLM
Navarro J de O. Construção de clones recombinantes de Bacillus subtilis por fusão dos genes CotC de endósporo e MCP (Major Capsid Protein) de isolado brasileiro de Ranavirus [Internet]. 2023 ;[citado 2026 mar. 15 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29022024-092129/ -
Vancouver
Navarro J de O. Construção de clones recombinantes de Bacillus subtilis por fusão dos genes CotC de endósporo e MCP (Major Capsid Protein) de isolado brasileiro de Ranavirus [Internet]. 2023 ;[citado 2026 mar. 15 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-29022024-092129/
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