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Tese

Análise comparativa do proteoma de membrana de promastigotas das cepas PH8 e LV79 de Leishmania (Leishmania) amazonensis.  (2021)

  • Authors:
  • Autor USP: TANO, FABIA TOMIE - ICB
  • Unidade: ICB
  • Sigla do Departamento: BMP
  • Subjects: PROTEÔMICA; PROTEÍNAS DA MEMBRANA; LEISHMANIA; FAGÓCITOS; MACRÓFAGOS; WESTERN BLOTTING; ATIVAÇÃO ENZIMÁTICA; FENÓTIPOS
  • Keywords: Leishmania (Leishmania) amazonenses; Leishmania (Leishmania) amazonensis; Cepas; Membrane proteins; Proteínas de membrana; Proteoma; Proteome; Strains
  • Language: Português
  • Abstract: Doenças humanas causadas por protozoários do gênero Leishmania são classificadas de acordo com suas manifestações clínicas em leishmaniose visceral e tegumentar. Recentemente, nosso grupo comparou as cepas PH8 e LV79 de Leishmania (Leishmania) amazonensis, um dos principais agentes etiológicos da leishmaniose tegumentar no Brasil. Parasitos da cepa PH8 causam lesões maiores e com maior carga parasitária em modelos murinos. Além disso, um maior número de promastigotas de PH8 adere e é internalizado por macrófagos murinos in vitro, indicando uma diferença na composição da membrana das cepas. Neste projeto mostramos que promastigotas de PH8 são mais resistentes à lise por complemento (soro) murino do que os de LV79. Tendo em mente as diferenças de infectividade e sensibilidade à lise descritas, este estudo teve como objetivo principal analisar a composição da membrana de promastigotas de fase estacionária inicial de PH8 e LV79, com o intuito de identificar moléculas potencialmente envolvidas nas diferenças de fenótipo observadas. Para tal, a caracterização bioquímica preliminar do lipofosfoglicano (LPG) e a análise comparativa do proteoma de membrana foram realizadas, e os resultados dessa última foram confirmados por Western blot e ensaios de atividade enzimática. A caracterização bioquímica preliminar indica que o LPG de PH8 possui um número menor de unidades repetitivas, que são desprovidas de cadeias laterais. Em contrapartida, o LPG de promastigotas de LV79 é formado por unidades repetitivas sem cadeia lateral ou com cadeias laterais compostas por mono- e dissacarídeos, confirmando a existência de polimorfismos entre cepas.A análise comparativa do proteoma de membrana indica que cada cepa possui um possui um perfil característico. Das 1659 proteínas identificadas, 127 são mais abundantes em promastigotas de PH8 e 78 mais abundantes em LV79. Dentre as proteínas mais abundantes em LV79, a maioria participa da síntese proteica (47%), do metabolismo de aminoácidos (21%) e do metabolismo de nucleotídeos (14%). Por outro lado, as proteínas mais abundantes em PH8 estão envolvidas principalmente no metabolismo de carboidratos (21%), na composição do citoesqueleto (17%) e no tráfego de vesículas e membrana (13%). Proteínas relacionadas à virulência como o transportador putativo ABC (ATP-binding cassette) da subfamília G, membro 1 e a enolase foram identificadas como mais abundantes em PH8, em contrapartida a glicoproteína 63 (GP63) foi identificada como mais abundante em LV79. As análises da abundância da GP63 e da enolase por Western blot confirmam o que foi observado na análise proteômica. Contudo, ensaios de atividade enzimática obtiveram resultados dissonantes, indicando que a atividade dessas proteínas pode ser regulada e não necessariamente corresponde a sua expressão. Ao todo, nossos resultados indicam que as composições da membrana de promastigotas de PH8 e LV79 diferem entre si. Experimentos adicionais precisam ser realizados para determinar as implicações dessas diferenças nos fenótipos das duas cepas
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 26.02.2021
    • Acesso à fonteAcesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      TANO, Fabia Tomie. Análise comparativa do proteoma de membrana de promastigotas das cepas PH8 e LV79 de Leishmania (Leishmania) amazonensis. . 2021. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18012024-184612/. Acesso em: 01 out. 2024.

    • APA

      Tano, F. T. (2021). Análise comparativa do proteoma de membrana de promastigotas das cepas PH8 e LV79 de Leishmania (Leishmania) amazonensis.  (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18012024-184612/

    • NLM

      Tano FT. Análise comparativa do proteoma de membrana de promastigotas das cepas PH8 e LV79 de Leishmania (Leishmania) amazonensis.  [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 01 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18012024-184612/

    • Vancouver

      Tano FT. Análise comparativa do proteoma de membrana de promastigotas das cepas PH8 e LV79 de Leishmania (Leishmania) amazonensis.  [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 01 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-18012024-184612/

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