Prospecção de anticorpos monoclonais humanos anti-Zika por phage display (2019)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, ISAURA BEATRIZ BORGES - Interunidades em Biotecnologia
- Unidade: Interunidades em Biotecnologia
- DOI: 10.11606/D.87.2019.tde-15092023-094854
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; ANTICORPOS MONOCLONAIS; ZIKA VÍRUS; ARTRÓPODES; SEQUENCIAMENTO GENÉTICO
- Keywords: Phage Display; Diagnosis; Diagnóstico; Phage Display; Zika virus; Zika vírus
- Language: Português
- Abstract: O vírus Zika (ZIKV) é um vírus emergente transmitido por artrópodes (arbovírus) e tem causado grande preocupação global, particularmente devido às síndromes congênitas e neurológicas associadas a esse vírus. Os sintomas clínicos iniciais da maioria dos arbovírus são muito semelhantes, tornando o diagnóstico clínico incerto e o diagnóstico laboratorial por sorologia com baixa acurácia entre os vírus antigenicamente relacionados, o que resulta na subnotificação das doenças por eles causadas. O ZIKV pertencente ao gênero Flavivirus, da família Flaviviridae, que também inclui alguns outros patógenos humanos importantes, como o vírus da dengue (DENV). Nestas infecções, a caracterização da imunidade humoral por meio do uso de anticorpos monoclonais associado a estudos estruturais representa um componente importante no fornecimento de informações quanto ao perfil antigênico, sendo essencial para o desenvolvimento de novos métodos de diagnóstico, terapêuticos e vacinas efetivas. Diante disso, foi objetivo do presente estudo o emprego da técnica phage display usando uma biblioteca de genes de anticorpos humanos para seleção de anticorpos monoclonais contra o ZIKV. Foram realizadas duas estratégias de biosseleção, a primeira foi uma biosseleção direta contra partículas de ZIKV, na segunda foi realizada uma abordagem de subtrativa, aplicando etapas de seleção negativa e positiva contra o ZIKV e o DENV2, sorotipo de DENV mais circulante atualmente no país e o mais associado a casos severos dentre os sorotipos.Após os ciclos de biosseleção, foi realizado um Sequenciamento de Nova Geração (NGS) das regiões VH e VL do DNA fagomídeo e análise dos dados obtidos. Posteriormente, foi realizado o desenho de fragmentos variáveis de cadeia única (scFvs) seguido de análises in silico dessas estruturas. Os resultados obtidos indicam que foram selecionadas sequências VHs e VLs com elevado enriquecimento na biosseleção, sugerindo uma elevada afinidade ao ZIKV e DENV2. Além disso, na segunda estratégia, foi possível obter sequências na seleção para o ZIKV que não se manifestaram ao longo da seleção para DENV2 e vice-versa. As análises in silico sugerem as possíveis interações dos scFvs com a proteína E do ZIKV e algumas das propriedades envolvidas nessas interações. A partir disso, esperamos poder contribuir para geração de novas perspectivas para o desenvolvimento de plataformas diagnósticas mais precisas para o ZIKV, contribuindo para maior eficiência no controle epidemiológico e, assim, melhor controle de dispersão e medidas contra infecções pelo ZIKV.
- Imprenta:
- Data da defesa: 10.12.2019
- Status:
- Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
- Versão do Documento:
- Versão publicada (Published version)
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-
ABNT
SILVA, Isaura Beatriz Borges. Prospecção de anticorpos monoclonais humanos anti-Zika por phage display. 2019. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15092023-094854/. Acesso em: 10 abr. 2026. -
APA
Silva, I. B. B. (2019). Prospecção de anticorpos monoclonais humanos anti-Zika por phage display (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15092023-094854/ -
NLM
Silva IBB. Prospecção de anticorpos monoclonais humanos anti-Zika por phage display [Internet]. 2019 ;[citado 2026 abr. 10 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15092023-094854/ -
Vancouver
Silva IBB. Prospecção de anticorpos monoclonais humanos anti-Zika por phage display [Internet]. 2019 ;[citado 2026 abr. 10 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15092023-094854/ - Polymerized laminin-modified microcapsules improve pancreatic islet resilience towards cytokine induced inflammatory stress and lower chemoattractant cytokine secretion
- Preconditioning MIN6 cells with prolactin (PRL), adiponectin (ADN), and necrostatin‐1 (NEC1) improves resilience to transplantation‐related stress
- A stamp device for agarose microwell-based 3D culture: a step toward insulin-producing organoids for diabetes studies and cell therapy
- Geração e caracterização de células produtoras de insulina (IPCs) a partir de células tronco pluripotentes induzidas (IPSCs)
- Generation of three-dimensional spheroids/organoids from two-dimensional cell cultures using a novel stamp device
- Development of ECM‐enhanced microcapsules for insulin‐producing cell encapsulation in type 1 diabetes therapy
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