Caracterização de culturas celulares homotípicas e heterotípicas em 3D de NSCLC e seu uso para screening de quimioterápicos (2022)
- Authors:
- Autor USP: GARNIQUE, ANALÍ DEL MILAGRO BERNABÉ - ICB
- Unidade: ICB
- DOI: 10.11606/T.42.2022.tde-18082023-100625
- Subjects: BIOLOGIA CELULAR; CULTURA DE CÉLULAS; CÉLULAS CULTIVADAS DE TUMOR; FIBROBLASTOS; MACRÓFAGOS; CÉLULAS-TRONCO; METÁSTASE NEOPLÁSICA; IMUNOFLUORESCÊNCIA; MICROSCOPIA ELETRÔNICA; QUIMIOTERÁPICOS
- Keywords: Cancer-associated Fibroblasts; Cell culture in 3D (Spheroids); Cultivo celular em 3D (Esferoides); Fibroblasto associado a câncer; Macrófago associado ao tumor; Microambiente tumoral; NSCLC; NSCLC; Tumor microenvironment; Tumor-associated macrophage
- Language: Português
- Abstract: Nos últimos anos o estudo do cultivo celular em 3D tem aumentado como um modelo que mimetiza o microambiente tumoral (TME). O TME carateriza-se por apresentar grande heterogeneidade celular, permitindo a modulação de diferentes vias de sinalização que permitem enriquecer esse microambiente. Vários tumores apresentam duas populações que se encontram em proporções elevadas, os fibroblastos associadados a câncer (CAFs) e os macrófagos associados ao tumor (TAM). Estas células estão entre as maiores responsáveis pela interação e modulação de diferentes vias de sinalização como citocinas e o remodelamento de matriz que resulta em vantagens na proliferação, invasão e metástase. Essa interação é a responsável pelo enriquecimento e manutenção de uma população que tem sido relacionadada à recidiva e metástase no câncer, elas apresentam características de autorenovação e início de tumor, e são chamadas de células tronco de câncer e apresentam expressão diferencial de fatores de transcrição assim como de marcadores de membrana celular. Assim, o objetivo deste trabalho é o estudo de culturas celulares em 3D de NSCLC sozinhas e em combinação com fibroblastos dérmicos de curta duração e com macrófagos diferenciados da linhagem THP-1.Foram caracterizados esferoides homotípicos A549, LC-HK2 e FDH e heterotípicos A549/FDH, LC-HK2/FDH, A549/Mcf e LC-HK2/Mcf, foram mantidos na cultura por 7 dias, a caracterização morfológica foi por meio de medida do diâmetro, acompanhamento da densidade celular, imunofluorescência do citoesqueleto das células que formam os esferoides, microscopia eletrônica de transmissão. Foi avaliada a viabilidade celular e proliferação por meio de coloração com Hoechst e IP, perfil do ciclo celular por citometria de fluxo, e ensaio de migração celular numa superfície aderente. Foi analisado também a expressão proteíca de CSC e proteínas de adesão celular. Os esferoides homotípicos e heterotípicos foram tratados com Doxorubicina, Estaurosporina, Cisplatina e Cromomicina A5. E foram avaliados seus efeitos na viabilidade celular, ciclo celular, senescência, e consumo de ATP. Os esferoides formados apresentaram diferentes características que permitem o estudo tanto na interação das diferentes células que compõem o microambiente tumoral quanto para o uso no teste de quimioterápicos
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- Data da defesa: 02.09.2022
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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ABNT
GARNIQUE, Anali Del Milagro Bernabe. Caracterização de culturas celulares homotípicas e heterotípicas em 3D de NSCLC e seu uso para screening de quimioterápicos. 2022. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2022. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-18082023-100625/. Acesso em: 03 jun. 2025. -
APA
Garnique, A. D. M. B. (2022). Caracterização de culturas celulares homotípicas e heterotípicas em 3D de NSCLC e seu uso para screening de quimioterápicos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-18082023-100625/ -
NLM
Garnique ADMB. Caracterização de culturas celulares homotípicas e heterotípicas em 3D de NSCLC e seu uso para screening de quimioterápicos [Internet]. 2022 ;[citado 2025 jun. 03 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-18082023-100625/ -
Vancouver
Garnique ADMB. Caracterização de culturas celulares homotípicas e heterotípicas em 3D de NSCLC e seu uso para screening de quimioterápicos [Internet]. 2022 ;[citado 2025 jun. 03 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-18082023-100625/ - Efeito de inibidores de telomerase sobre células tumorais de pulmão humano e sobre células imortalizadas com hTERT
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Informações sobre o DOI: 10.11606/T.42.2022.tde-18082023-100625 (Fonte: oaDOI API)
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