Análise automatizada da frequência de micronúcleos em culturas celulares expostas a agentes genotóxicos físicos e quimícos (2019)
- Authors:
- Autor USP: CARVALHO, LUMA RAMIREZ DE - IPEN
- Unidade: IPEN
- DOI: 10.11606/D.85.2019.tde-22072019-075930
- Subjects: FREQUÊNCIA DE RESPOSTAS; TOXICOLOGIA; QUELATO; CULTURA DE CÉLULAS; DNA; MICROFORMAS; CONTROLE BIOLÓGICO; RADIOTRAÇADORES; RADIOTRAÇADORES
- Language: Português
- Abstract: O ensaio de frequência de micronúcleos é uma técnica importante utilizada para avaliar danos genotóxicos de agentes químicos ou físicos (como radiação ionizante) em células, baseado na quantificação de células contendo micronúcleos, que são fragmentos derivados de DNA danificado com coloração semelhante ao dos núcleos principais, mas com 5 a 30% do seu tamanho. Tradicionalmente, este ensaio é realizado usando microscopia de coloração convencional de acordo com Giemsa, mas atualmente esta técnica está sendo atualizada para uma abordagem automatizada que se baseia na dissolução da membrana plasmática por detergentes levando em conta apenas núcleos e micronúcleos com seu DNA corados por corantes fluorescentes, que pode discriminar núcleos de células viáveis dos das células inviáveis e permite a contagem por citometria de fluxo. Este trabalho avaliou a extensão de dano genotóxico radioinduzido por radiação gama (^[60]Co) em doses entre 0,5 e 16Gy, e o potencial genotóxico de três peptídeos utilizados em medicina nuclear (PSMA-617, PSMA-11 e Ubiquicidina 29-41). As membranas celulares foram lisadas na presença dos corantes SYTOX® Green e EMA, e núcleos marcados com os dois fluorocromos foram considerados provenientes de células inviáveis e, portanto, removidos da análise. As quantidades de micronúcleos (porcentagem de eventos) nas amostras, foram proporcionais às doses de radiação, e puderam ser ajustadas a um modelo linear-quadrático (R^[2] = 0,993). Somente doses mais altas(8 e 16 Gy) e controles positivos induziram aumentos relevantes nas quantidades de micronúcleos. Os radiofármacos foram testados com concentrações de 0,1x, x, 10x e 100x a concentração utilizada em adultos, e não induziram dano em concentrações praticáveis
- Imprenta:
- Data da defesa: 21.05.2019
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
CARVALHO, Luma Ramirez de. Análise automatizada da frequência de micronúcleos em culturas celulares expostas a agentes genotóxicos físicos e quimícos. 2019. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-22072019-075930/. Acesso em: 23 jul. 2024. -
APA
Carvalho, L. R. de. (2019). Análise automatizada da frequência de micronúcleos em culturas celulares expostas a agentes genotóxicos físicos e quimícos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-22072019-075930/ -
NLM
Carvalho LR de. Análise automatizada da frequência de micronúcleos em culturas celulares expostas a agentes genotóxicos físicos e quimícos [Internet]. 2019 ;[citado 2024 jul. 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-22072019-075930/ -
Vancouver
Carvalho LR de. Análise automatizada da frequência de micronúcleos em culturas celulares expostas a agentes genotóxicos físicos e quimícos [Internet]. 2019 ;[citado 2024 jul. 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-22072019-075930/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.85.2019.tde-22072019-075930 (Fonte: oaDOI API)
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