Caracterização da interação entre a nucleofosmina e a proteína de matriz do Vírus Sincicial Respiratório Humano e suas implicações na replicação viral (2022)
- Authors:
- Autor USP: BARBOSA, ANA BEATRIZ RUIZ AFONSO - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMM
- DOI: 10.11606/T.42.2022.tde-27022023-115108
- Subjects: PROTEÍNAS DE MATRIZ EXTRACELULARES; REPLICAÇÃO VIRAL; PARAMYXOVIRIDAE; DOENÇAS RESPIRATÓRIAS; INFECÇÕES RESPIRATÓRIAS; INFECÇÕES POR VÍRUS DE RNA
- Keywords: hRSV; hRSV; Human respiratory syncytial virus; Interação vírus-célula; Matrix protein; NPM1; NPM1; Nucleofosmina; Nucleophosmin; Proteína de Matriz; Vírus sincicial respiratório humano; Virus-cell interaction; Virus Sincicial Respiratório
- Language: Português
- Abstract: O Vírus Sincicial Respiratório Humano (hRSV) está entre os patógenos mais importantes do trato respiratório. Esse vírus causa doença respiratória principalmente em recém-nascidos, bebês, crianças, idosos e pacientes imunocomprometidos. Até o presente não há antiviral eficiente ou vacina aprovada. O genoma do hRSV codifica 11 proteínas, sendo elas de extrema importância para o entendimento da relação vírus-hospedeiro. Em trabalhos anteriores do laboratório foram analisadas as interações das proteínas virais Nucleoproteína (N), Fosfoproteína (P) e Matriz (M) com proteínas celulares, tanto pela expressão individual dessas proteínas virais transfectando vetores plasmidiais, quanto no contexto de infecção. Verificou-se que N interage com as proteínas celulares Hsp70, PRMT5 e WDR77; P interage com Hsp70 e com Tropomiosina; e M com Nucleofosmina (NPM1) e Tropomiosina. Neste projeto temos por objetivo caracterizar a interação da proteína de Matriz do hRSV com NPM1, além de buscar possíveis implicações funcionais para a replicação do vírus. A proteína de M tem sido implicada com a montagem e brotamento da partícula viral, além da inibição da transcrição do genoma viral e de genes celulares. No início da infecção, a proteína M localiza-se no núcleo da célula hospedeira, onde postulávamos ocorrer a interação com a NPM1, proteína originalmente nucleolar, multifuncional, com capacidade de transitar entre o nucléolo, núcleo e citoplasma. Assim, propusemos confirmar tal interação e analisar, em diferentes fases da replicação viral, a distribuição intracelular de ambas as proteínas.Fizemos ensaios funcionais, avaliando a replicação do vírus após inibição de NPM1, e observamos a ação de um inibidor da oligomerização de NPM1 na replicação viral. Os resultados mostraram que a NPM1 não mudou sua redistribuição em células infectadas pelo hRSV, permanecendo nucleolar e nucleoplasmática, assim como em células não infectadas, além de não observarmos pontos de co-localização entre M e NPM1 por imunofluorescência confocal. O mesmo foi visto ao transfectarmos vetor de expressão para a proteína M. Em estudos de fracionamento celular de células infectadas, observamos indícios de um aumento de NPM1 para o nucleoplasma e para a cromatina em células infectadas. No entanto, em fracionamento de células expressando apenas M, não observamos o mesmo padrão. A partir de um shRNA direcionado contra mRNA de NPM1, foi possível observar a diminuição da expressão de fosfoproteína P em células infectadas, mesmo padrão observado ao tratar as células com um inibidor da oligomerização da NPM1 (NSC348884). Tratamento com este inibidor também teve a capacidade de prejudicar a síntese global de proteínas virais. Tais resultados sugerem que a NPM1 interfira no ciclo replicativo do hRSV
- Imprenta:
- Data da defesa: 28.10.2022
- Status:
- Artigo publicado em periódico de acesso aberto (Gold Open Access)
- Versão do Documento:
- Versão publicada (Published version)
- Acessar versão aberta:
-
ABNT
BARBOSA, Ana Beatriz Ruiz Afonso. Caracterização da interação entre a nucleofosmina e a proteína de matriz do Vírus Sincicial Respiratório Humano e suas implicações na replicação viral. 2022. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2022. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-27022023-115108/. Acesso em: 07 abr. 2026. -
APA
Barbosa, A. B. R. A. (2022). Caracterização da interação entre a nucleofosmina e a proteína de matriz do Vírus Sincicial Respiratório Humano e suas implicações na replicação viral (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-27022023-115108/ -
NLM
Barbosa ABRA. Caracterização da interação entre a nucleofosmina e a proteína de matriz do Vírus Sincicial Respiratório Humano e suas implicações na replicação viral [Internet]. 2022 ;[citado 2026 abr. 07 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-27022023-115108/ -
Vancouver
Barbosa ABRA. Caracterização da interação entre a nucleofosmina e a proteína de matriz do Vírus Sincicial Respiratório Humano e suas implicações na replicação viral [Internet]. 2022 ;[citado 2026 abr. 07 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-27022023-115108/
Informações sobre a disponibilidade de versões do artigo em acesso aberto coletadas automaticamente via oaDOI API (Unpaywall).
Por se tratar de integração com serviço externo, podem existir diferentes versões do trabalho (como preprints ou postprints), que podem diferir da versão publicada.
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
