Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos (2022)
- Authors:
- Autor USP: CORTEZ, ANELYSE ABREU - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCM
- DOI: 10.11606/D.76.2022.tde-03012023-153143
- Subjects: BIOFILMES; ENZIMAS
- Keywords: Biofilme dental; Dental biofilm; Glucanase; Sinergismo; Synergism
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Biofilmes dentais caracterizam um problema de saúde oral pois podem culminar no desenvolvimento de cáries e outras doenças bucais bastante onerosas. Seus principais constituintes são os polissacarídeos extracelulares insolúveis. Tais componentes estão diretamente relacionados com a cariogenicidade das comunidades bacterianas e são formados por ligações glicosídicas (1 → 3)- α e (1 → 6)- α.Considerando a estrutura química dessas moléculas e sua importância para o biofilme dental, o emprego de enzimas exógenas capazes de clivar essas ligações glicosídicas, denominadas glucanases, se mostra uma estratégia promissora para o controle desses biofilmes. No presente trabalho, uma (1 → 3)- α (PmGH87) e uma (1 → 6)-α (CoGH66) glucanase de Prevotella melaninogenica e Capnocytophaga ochraceae, respectivamente, foram clonadas e expressas heterologamente. Após sua purificação, as condições ótimas de pH e temperatura para a atividade catalítica de cada enzima foram determinadas, bem como sua termo estabilidade estrutural em diferentes tampões e pHs. Através de modelagem preditiva, as estruturas tridimensionais de ambas as enzimas foi avaliada. Por fim, a atividade dessas glucanases na inibição da formação e degradação de biofilmes pré-formados de Streptococcus mutans crescidos em meio de cultura contendo 0,1 ou 1% de sacarose foi avaliada em termos de quantificação de biomassa total, polissacarídeos insolúveis, microscopia confocal e produto dhidrólise. Os resultados sugerem que tanto a PmGH87 quanto a CoGH66 são capazes de inibir a formação dos biofilmes crescidos em condição limitada ou abundante de sacarose. Entretanto, a combinação de ambas não resulta em efeito sinérgico. Os dados de degradação de biofilmes pré-formados apontam um efeito tempo-dependente para o tratamento com cada enzima sozinha. Além disso, observou-se um efeito sinérgico e dose-dependente proveniente do tratamento enzimático combinado das glucanases, onde a maior degradação observada foi de 95,5% em 30 minutos de tratamento para o biofilme crescido em baixa concentração de sacarose, e 93,8% após 2 horas de tratamento para o biofilme crescido em condição abundante do açúcar, cujos graus de sinergismo calculados foram de 5,54 e 3,18, respectivamente. Em conclusão, ambas as glucanases estudadas neste trabalho são efetivas na inibição da formação e na degradação de biofilmes previamente formados de S. mutans. Esses resultados são essenciais para o desenvolvimento de aplicações biotecnológicas e biomédicas que visam o controle de biofilmes bacteriano
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- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2022
- Data da defesa: 31.10.2022
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
CORTEZ, Anelyse Abreu. Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos. 2022. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2022. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/. Acesso em: 13 nov. 2024. -
APA
Cortez, A. A. (2022). Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/ -
NLM
Cortez AA. Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos [Internet]. 2022 ;[citado 2024 nov. 13 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/ -
Vancouver
Cortez AA. Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos [Internet]. 2022 ;[citado 2024 nov. 13 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/ - Produção e caracterização de nanocelulose obtida a partir de resíduos celulósicos utilizando enzimas ativas em carboidratos complexos
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Informações sobre o DOI: 10.11606/D.76.2022.tde-03012023-153143 (Fonte: oaDOI API)
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