O estudo ontogenético da composição de inibidores de veneno de serpentes e a avaliação da atividade neutralizante do γ-PLI presente no plasma de Bothrops jararaca (2021)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, CAROLINE SERINO - Interunidades em Biotecnologia
- Unidade: Interunidades em Biotecnologia
- Subjects: ONTOGENIA; VENENOS DE ORIGEM ANIMAL; SERPENTES; FOSFOLIPASES A; ANIMAIS PEÇONHENTOS; PLASMA; ATIVAÇÃO ENZIMÁTICA; ESPECTROMETRIA DE MASSAS; WESTERN BLOTTING; ANTICOAGULANTES
- Keywords: Envenenamento; Envenomation; Fosfolipase A2; Inibidor de PLA2; Phospholipases A2; PLA2 inhibitor; Serpente peçonhenta; Venomous snakes
- Language: Português
- Abstract: Os inibidores naturais de venenos de serpentes têm sido estudados há mais de um século. Entre eles, estão as proteínas de plasma de alguns mamíferos e de serpentes não peçonhentas e peçonhentas, que possuem a capacidade de promover uma resistência ao veneno. Estas proteínas têm despertado o interesse biotecnológico, já que são uma ótima alternativa para o desenvolvimento de novos fármacos. As principais proteínas encontradas no plasma desses animais, com capacidade de neutralização do veneno, são os inibidores de metaloproteinases e os inibidores de PLA2 (PLIs). A PLA2 atua no efeito local do envenenamento, causando inflamação do tecido na área afetada. Nesse contexto, recentemente foi isolado o γBjPLI, que é um PLI presente no sangue da serpente peçonhenta Bothrops jararacai. Esta proteína pertence à classe gama (γ), com base em domínios estruturais característicos. O γBjPLI possui aproximadamente 22 kDa e inibe as atividades enzimáticas, edematogênicas e mionecróticas das PLA2, sugerindo um papel desse inibidor na proteção dessas serpentes contra o autoenvenenamento. Baseado nessas informações, neste trabalho, foi estudado de forma comparativa a composição proteica do plasma de neonatos, jovens e adultos, fêmeas e machos de B jararaca, por análises de SDS-PAGE, Western blotting, cromatografia de afinidade, ELISA e espectrometria de massa.Tais análises permitiram identificar proteínas do tipo PLI (γPLI, γPLI e γPLI) em todas as fases da vida, sendo que γPLI e γPLI foram identificados pela primeira vez no plasma da serpente B. jararaca. Também foi realizada a avaliação da interação e neutralização da atividade anticoagulante da crotoxina por tromboelastometria, em que o γBjPLI foi capaz de inibir até 82% da atividade dessa toxina. Ademais, mostrou uma maior afinidade pela PLA2 Asp-49 em comparação à PLA2 Lys-49, tanto por apresentar uma alteração em espectros obtidos por dicroísmo circular, quanto pela inibição das atividades miotóxicas e edematogênicas, com valores de 19,6% e 38,5% para a PLA2 Asp-49, superiores aos 16% e 19,6% para a PLA2 Lys-49, respectivamente. Além disso, para estabelecer novos métodos de obtenção destes inibidores com maiores rendimentos mantendo a estabilidade e atividade, o γBjPLI foi clonado e expresso utilizando o vetor pET28a e a cepa de expressão SHuffle da espécie de bactéria Escherichia coli.
- Imprenta:
- Data da defesa: 05.11.2021
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ABNT
SILVA, Caroline Serino. O estudo ontogenético da composição de inibidores de veneno de serpentes e a avaliação da atividade neutralizante do γ-PLI presente no plasma de Bothrops jararaca. 2021. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-18052022-143245/. Acesso em: 29 dez. 2025. -
APA
Silva, C. S. (2021). O estudo ontogenético da composição de inibidores de veneno de serpentes e a avaliação da atividade neutralizante do γ-PLI presente no plasma de Bothrops jararaca (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-18052022-143245/ -
NLM
Silva CS. O estudo ontogenético da composição de inibidores de veneno de serpentes e a avaliação da atividade neutralizante do γ-PLI presente no plasma de Bothrops jararaca [Internet]. 2021 ;[citado 2025 dez. 29 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-18052022-143245/ -
Vancouver
Silva CS. O estudo ontogenético da composição de inibidores de veneno de serpentes e a avaliação da atividade neutralizante do γ-PLI presente no plasma de Bothrops jararaca [Internet]. 2021 ;[citado 2025 dez. 29 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-18052022-143245/
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