Análise da variabilidade genética e imunoinformática da glicosiltransferase de Ureaplasma diversum e sua relação com a constituição, antigenicidade e imunogenicidade do polissacarídeo capsular (2021)
- Authors:
- Autor USP: REZENDE, IZADORA DE SOUZA - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMM
- DOI: 10.11606/T.42.2021.tde-04032022-172441
- Subjects: MICROBIOLOGIA; MYCOPLASMA; TRANSFERASES; BIOINFORMÁTICA; IMUNOGENÉTICA; CITOCINAS; POLISSACARÍDEOS BACTERIANOS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; BOVINOS; SEQUENCIAMENTO GENÉTICO
- Keywords: Ureaplasma diversum; Ureaplasma diversum; Bioinformática; Bioinformatics; Cápsula; Capsule; Glicosiltransferase; Glycosyltransferase; Immunogenicity; Imunogenicidade
- Language: Português
- Abstract: A economia do setor agro-industrial está diretamente relacionada à saúde dos rebanhos. A ocorrência de infertilidade, pode ser causada por micoplasmas e ureaplasmas, e pode levar a prejuízos. Ureaplasma diversum pode causar infecções e ativar a resposta imune e ativação de TLRs (Toll Like Receptors), bem como maturação de citocinas pró-inflamatórias. O recente sequenciamento do genoma de Ureaplasma diversum, permitiu aprimorar a compreensão da biologia molecular destas infecções e ampliar as possibilidades de desenvolvimento de novas alternativas diagnósticas e de prevenção. O objetivo deste estudo é avaliar a variabilidade genética e imunoinformática do gene da glicosiltransferase de U. diversum e sua relação com a constituição e antigenicidade e imunogenicidade do polissacarídeo capsular. Para tanto foi utilizada a cepa de referência de U. diversum ATCC 49782 e 52 isolados de swab vulvovaginal de bovinos. Foi realizada PCR para identificação do gene UD216, codificador da glicosiltransferase. Os amplicons foram sequenciados e construída uma árvore filogenética. As sequencias foram analisadas por meio de técnicas de bioinformática para predição de antigenicidade e características para expressão heteróloga. As análises de imuno e antigenicidade foram realizadas com cultura de PBMC bovinos. O ensaio de linfoproliferação foi feito por CFSE. Camundongos Balb/c foram usados para a produção de anticorpos policlonais. Foi avaliada a expressão gênica por qPCR de IL-1β, TNF-α, TLR2, TNF-α, TLR2, TLR4 e iNOS. O nitrito foi dosado pelo método de Griess.Após a realização de PCR dos 52 isolados de U. diversum, 69% (n=36) foram positivas para o gene UD216, distribuidas nos diferentes estados brasileiros de coleta. Com o sequenciamento, as amostras formaram grupos de acordo com a proximidade gênica entre elas, compreendendo amostras coletadas em um mesmo lugar. As predições por bioinformática informaram que a sequência codificante do gene UD216 não possui características de antigenicidade mas tem capacidade de ligação a alelos de MHCI. As variações na sequencia e na composição de açúcares podem relacionar com mecanismos de variação antigênica e de escape a resposta imune. A presença do polissacarídeo capsular não induziu proliferação linfocitária em PBMC bovinos nem anticorpos específicos em camundongos. A expressão gênica de marcadores inflamatórios foi discreta, mas houve o aumento do nitrito nas culturas após a exposição ao CPS. Com os resultados obtidos será possível fomentar a discussão da importância e relevância do polissacarídeo capsular nas infecções por U. diversum, na reprodução e bovinocultura no cenário brasileiro e dar base para o desenvolvimento de ensaios diagnósticos e terapias mais eficientes
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- Data da defesa: 07.12.2021
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ABNT
REZENDE, Izadora de Souza. Análise da variabilidade genética e imunoinformática da glicosiltransferase de Ureaplasma diversum e sua relação com a constituição, antigenicidade e imunogenicidade do polissacarídeo capsular. 2021. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-172441/. Acesso em: 09 out. 2024. -
APA
Rezende, I. de S. (2021). Análise da variabilidade genética e imunoinformática da glicosiltransferase de Ureaplasma diversum e sua relação com a constituição, antigenicidade e imunogenicidade do polissacarídeo capsular (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-172441/ -
NLM
Rezende I de S. Análise da variabilidade genética e imunoinformática da glicosiltransferase de Ureaplasma diversum e sua relação com a constituição, antigenicidade e imunogenicidade do polissacarídeo capsular [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 09 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-172441/ -
Vancouver
Rezende I de S. Análise da variabilidade genética e imunoinformática da glicosiltransferase de Ureaplasma diversum e sua relação com a constituição, antigenicidade e imunogenicidade do polissacarídeo capsular [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 09 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-172441/ - Resposta de macrófagos e blastocistos bovinos após a exposição a Ureaplasma diversum
- Immunoinformatics and analysis of antigen distribution of Ureaplasma diversum strains isolated from different Brazilian states
- Heterologous expression, purification, and immunomodulatory effects of recombinant Lipoprotein GUDIV-103 isolated from Ureaplasma diversum
- Multilocus sequence typing characterizes diversity of ureaplasma diversum strains, and intra-species variability induces different immune response profiles
- Novel antigenic proteins of Mycoplasma agalactiae as potential vaccine and serodiagnostic candidates
- Ureaplasma diversum and its membrane-associated lipoproteins activate inflammatory genes through the NF-κB pathway via toll-like receptor 4
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.42.2021.tde-04032022-172441 (Fonte: oaDOI API)
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