Proteínas de superfície de Mycoplasma agalactiae atuam como adesinas, interagem com proteínas do hospedeiro e ativam vias de dano ao DNA (2021)
- Authors:
- Autor USP: BARBOSA, MAYSA SANTOS - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMM
- DOI: 10.11606/T.42.2021.tde-04032022-154245
- Subjects: MOLLICUTES; MATRIZ EXTRACELULAR; PROTEINAS DA MEMBRANA; MYCOPLASMA; PROTEINAS RECOMBINANTES; LIPOPROTEINAS; DANO AO DNA
- Keywords: Mollicutes; Mollicutes; Adesão; Adhesion; Dano ao DNA; DNA damage; Extracellular matrix; Matriz extracelular; Membrane proteins; Proteínas de membrana
- Language: Português
- Abstract: Agalaxia contagiosa (AC) afeta pequenos ruminantes, é classificada pela World Organisation for Animal Health (OIE) como doença de notificação obrigatória devido ao impacto econômico significativo sobre a produção de ovinos e caprinos. Mycoplasma agalactiae é o principal causador dessa doença e apesar do progresso nos estudos sobre métodos diagnósticos, terapêuticos e de prevenção, as estratégias ainda permanecem ineficientes no controle da AC. O presente estudo teve como objetivo caracterizar funcionalmente proteínas de membrana de M. agalactiae como adesinas e avaliar a interação destas com moléculas e células do hospedeiro. Três proteínas de M. agalactiae (P40 - controle positivo -, MAG_1560 e MAG_6130), caracterizadas in silico como proteínas da membrana antigênicas, foram expressas em Escherichia coli BL21 Star^[TM] (DE3) One Shot e purificadas em uma coluna de afinidade. Posteriormente, coelhos foram imunizados com proteínas recombinantes para a produção de anticorpos policlonais. A localização das proteínas no micro-organismo foi avaliada por colony blotting e western blotting após fracionamento da fase TX-114. Para avaliar se as proteínas recombinantes são adesinas, foram realizados ensaios de adesão à células HeLa e estromais mamárias primárias de ovelhas (sheep primary mammary stromal cells - MSC). Os resultados obtidos confirmaram MAG_1560 e MAG_6130 como lipoproteínas, como a citoadesina P40. As proteínas P40, MAG_1560 e MAG_6130 também demonstraram citotoxicidade ao diminuir a viabilidade celular e aumentar a expressão de genes relacionados às vias de reparo do DNA e genes pró-apoptóticosPara avaliar a interação destas proteínas com moléculas do hospedeiro realizou-se ensaio de adesão ao plasminogênio, fibrinogênio, lactoferrina e fibronectina. Além disso, este estudo demonstrou que as proteínas MAG_6130 e MAG_1560 tem capacidade de aderir às células eucarióticas e a adesão dessas proteínas às células pode ser inibida por anti-soro específico por ao menos uma metodologia. Além disso, P40 interage significativamente com plasminogênio, e em geral, P40, MAG_6130 e MAG_1560 exibiram ligação significativa à lactoferrina, fibrinogênio e fibronectina, uma característica que poderia potencialmente apoiar o patógeno na colonização do hospedeiro, migração de tecido e evasão imune. Ainda assim, mais estudos serão necessários para estabelecer mais claramente a relação entre P40, MAG_1560 e MAG_6130 e seus efeitos no hospedeiro. Dessa forma, demonstra-se que essas proteínas estão envolvidas na citoadesão e contribuem para a patogenicidade bacteriana das células hospedeiras. Entretanto, ainda não está claro como essas proteínas ativam o sistema imune e qual a via de reparo de DNA é ativada. Os resultados deste estudo contribuiem na melhor compreensão da função das moléculas de superfície em micoplasmas e o papel destas durante a infecção
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- Data da defesa: 19.11.2021
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
BARBOSA, Maysa Santos. Proteínas de superfície de Mycoplasma agalactiae atuam como adesinas, interagem com proteínas do hospedeiro e ativam vias de dano ao DNA. 2021. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-154245/. Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Barbosa, M. S. (2021). Proteínas de superfície de Mycoplasma agalactiae atuam como adesinas, interagem com proteínas do hospedeiro e ativam vias de dano ao DNA (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-154245/ -
NLM
Barbosa MS. Proteínas de superfície de Mycoplasma agalactiae atuam como adesinas, interagem com proteínas do hospedeiro e ativam vias de dano ao DNA [Internet]. 2021 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-154245/ -
Vancouver
Barbosa MS. Proteínas de superfície de Mycoplasma agalactiae atuam como adesinas, interagem com proteínas do hospedeiro e ativam vias de dano ao DNA [Internet]. 2021 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04032022-154245/ - Clonagem, purificação e caracterização de proteínas antigênicas recombinantes obtidas de Mycoplasma agalactiae
- Predominant single stable VpmaV expression in strain GM139 and major differences with Mycoplasma agalactiae Type Strain PG2
- Microbiological and molecular detection of Mycoplasma bovis in milk samples from bovine clinical mastitis
- Immunoinformatics and analysis of antigen distribution of Ureaplasma diversum strains isolated from different Brazilian states
- Potential of maintaining a healthy vaginal environment by two Lactobacillus strains isolated from cocoa fermentation
- Host cell interactions of novel antigenic membrane proteins of Mycoplasma agalactiae
- Evaluating the presence of Mycoplasma hyorhinis, Fusobacterium nucleatum, and Helicobacter pylori in biopsies of patients with gastric cancer
- Heterologous expression, purification, and immunomodulatory effects of recombinant Lipoprotein GUDIV-103 isolated from Ureaplasma diversum
- Multilocus sequence typing characterizes diversity of ureaplasma diversum strains, and intra-species variability induces different immune response profiles
- Novel antigenic proteins of Mycoplasma agalactiae as potential vaccine and serodiagnostic candidates
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.42.2021.tde-04032022-154245 (Fonte: oaDOI API)
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