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Influence of sub-clinical endometritis on early pregnancy predictors and pro-inflammatory cytokines in circulating immune cells in dairy cows (2021)

  • Authors:
  • Autor USP: POIT, DIEGO ANGELO SCHMIDT - FMVZ
  • Unidade: FMVZ
  • Sigla do Departamento: VRA
  • DOI: 10.11606/D.10.2021.tde-14032022-142825
  • Subjects: CITOCINAS; ENDOMETRITE ANIMAL; VACAS
  • Keywords: Early pregnancy predictors; ISGs; Pro-inflammatory cytokines; Sub-clinical endometritis
  • Agências de fomento:
  • Language: Inglês
  • Abstract: O desenvolvimento de técnicas capazes de diagnosticar a gestação antes do retorno do estro em vacas leiteiras é essencial para melhorar a eficiência reprodutiva dos sistemas de produção. No presente estudo, nossos objetivos foram: 1) avaliar se a expressão de ISGs e citocinas pró-inflamatórias em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) é afetada em vacas leiteiras com SCE em comparação com vacas saudáveis; e 2) comparar a precisão dos preditores precoces de gestação (ISGs e US-Doppler) em animais com e sem SCE. Para tal, foram realizados dois experimentos, no Experimento 1, 30 vacas holandesas, que estavam no período de espera voluntária, entre 30 e 37 dias pós-parto, foram submetidas a um exame reprodutivo por palpação transretal e ultrassonografia, sendo que todas as vacas que não apresentaram qualquer sinal de doença uterina foram incluídas no estudo e foram submetidas a um protocolo de sincronização da ovulação (protocolo de Co-synch com algumas modificações). Sete dias depois (Dia 0; dia do cio esperado), a ocorrência de SCE foi diagnosticada pela contagem da proporção de células polimorfonucleares (PMN) em uma amostra de citologia uterina coletada pela técnica Cytobrush. Nos Dias 0 e 7 (diestro), foram coletadas amostras de sangue da cauda para isolamento de células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) e determinação da expressão gênica por RT-PCR. Amostras de 6 animais com SCE (SCE) e 6 animais saudáveis (NUD) foram selecionadas para a análise de expressão genica.Já no Experimento 2, foram utilizadas 50 vacas Holandesas, que estavam entre 40 e 55 dias pós-parto, com objetivo de avaliar a expressão dos genes alvos, assim como da perfusão sanguínea luteal em animais que foram diagnosticados com SCE no início do protocolo de inseminação artificial de tempo fixo (IATF). No dia -10 (D0, o dia da IATF) os animais foram submetidos a um exame reprodutivo e para aqueles detectados sem qualquer sinal de doença uterina, submetidos a técnica do Cytobrush como descrito em Experimento 1. No D21 após o protocolo de IATF, os animais foram avaliados por ultrassonografia transretal em modo Doppler colorido para avaliar a perfusão sanguínea no corpo lúteo e uma amostra de sangue da cauda foi coletada para isolamento das PBMCs. No D32, um diagnóstico confirmatório de prenhez foi feito por ultrassonografia modo-B. Animais com ≥ 5 % do PMN no Exp 1 e ≥ 5,5% no Exp 2 foram considerados com SCE, e aqueles com ≤ 3% do PMN no Exp 1 e ≤ 2% na Exp 2 foram considerados sem doenças uterinas (grupo NUD). Assim, no Exp 2, 29 vacas holandesas, foram alocados nos seguintes grupos: animais saudáveis e gestantes (NUD-P; n=7); com SCE e gestantes (SCE-P; n=4); saudáveis e não gestantes (NUD-NP; n=8); e com SCE e não gestantes (SCE-NP; n=10). Foi avaliada a expressão gênica nas PBMCs por RT-PCR de ISGs (ISG15, OAS1, MX1 e IFI6) e citocinas pró-inflamatórias (IL1- β, TNF- α e IFN- γ). No Exp. 1, a expressão ISG15, MX1, IFI6, TNF- α e IFN- γ não foi alterada pela presença de SCE ou momento da avaliação (Dia 0 ou 7; P > 0,1). Entretanto, a expressão de OAS1 e IL1- β nas PBMCs foi maior no dia 7 que no dia 0 (P=0,02).No Exp. 2, nenhum efeito significativo (P > 0,1) do status gestacional, ocorrência da SCE, ou sua interação foi observada na expressão de OAS1, MX1, IFI6 e IFN- γ (P >0,10). A abundância da ISG15, TNF- α e IL1- β foi maior (P=0,008, P=0,05 e P=0,06, respectivamente) nos animais gestantes em comparação aos não gestantes. Para a perfusão sanguínea luteal, apenas um efeito significativo da gestação (P=0,01) foi observado, sendo maior nos animais gestantes. Em conclusão, a expressão de OAS1 e IL1- β é mais elevada durante o diestro em vacas de leite, independentemente da presença da SCE e mesmo na ausência do concepto. Por outro lado, a expressão de ISG15, MX1, IFI6, TNF- α e IFN- γ não sofrem alteração tanto pela ocorrência da SCE ou fase do ciclo estral. A expressão de ISG15, IL1- β e TNF- α no dia 21 pós-IATF é maior em vacas gestantes que não gestantes, independentemente da ocorrência da SCE. A abundância de ISG15 é um bom preditor precoce de gestação, independentemente da ocorrência da SCE. Já a perfusão luteal e a abundância de OAS1, são bons preditores precoces da gestação apenas em vacas sem SCE. A abundância de MX1 e IFI6 não se mostraram bons preditores aos 21 dias após a IATF.
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 20.12.2021
    • Acesso à fonteAcesso à fonteDOI
    Informações sobre o DOI: 10.11606/D.10.2021.tde-14032022-142825 (Fonte: oaDOI API)
    • Este periódico é de acesso aberto
    • Este artigo é de acesso aberto
    • URL de acesso aberto
    • Cor do Acesso Aberto: gold
    • Licença: cc-by-nc-sa
    How to cite
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    • ABNT

      POIT, Diego Angelo Schmidt. Influence of sub-clinical endometritis on early pregnancy predictors and pro-inflammatory cytokines in circulating immune cells in dairy cows. 2021. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14032022-142825/. Acesso em: 04 nov. 2024.

    • APA

      Poit, D. A. S. (2021). Influence of sub-clinical endometritis on early pregnancy predictors and pro-inflammatory cytokines in circulating immune cells in dairy cows (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Pirassununga. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14032022-142825/

    • NLM

      Poit DAS. Influence of sub-clinical endometritis on early pregnancy predictors and pro-inflammatory cytokines in circulating immune cells in dairy cows [Internet]. 2021 ;[citado 2024 nov. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14032022-142825/

    • Vancouver

      Poit DAS. Influence of sub-clinical endometritis on early pregnancy predictors and pro-inflammatory cytokines in circulating immune cells in dairy cows [Internet]. 2021 ;[citado 2024 nov. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-14032022-142825/

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