Establishment and characterization of embryonic cell lines of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (RBME-6) and Amblyomma sculptum (ASE-14) (Acari:Ixodida) from Brazil (2021)
- Authors:
- Autor USP: DUARTE, LEIDIANE LIMA - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VPS
- DOI: 10.11606/T.10.2021.tde-15032022-101838
- Subjects: BRASIL; CARRAPATOS; CROMOSSOMOS; LINHAGEM CELULAR
- Keywords: Brazil; Cattle tick; Cell line; Chromosome; Star tick
- Agências de fomento:
- Language: Inglês
- Abstract: Os carrapatos são artrópodes de grande importância médica e veterinária, sendo responsáveis pela transmissão de vírus, bactérias, helmintos e protozoários aos seus hospedeiros. Alguns dos patógenos transmitidos por carrapatos são difíceis de cultivar in vitro e não se multiplicam em meios artificiais ou outros substratos. As linhagens de células de carrapatos representam uma ferramenta útil para estudar muitos aspectos da pesquisa de carrapatos e patógenos transmitidos por eles. Aqui, estabelecemos e caracterizamos duas linhagens celulares RBME-6 e ASE-14 derivadas de embriões de Rhipicephalus microplus e Amblyomma sculptum, respectivamente, ambos coletados no Brasil. Culturas primárias de células foram preparadas a partir de ovos embrionados das duas espécies de carrapatos, em meio L-15B, e mantidas à 30ºC. Quando as culturas atingiram uma densidade celular adequada, foram subcultivadas e criopreservadas em várias passagens. As análises citológicas foram feitas usando microscopia de contraste de fase, com células que foram submetidas à citocentrifugação e coradas com Giemsa, enquanto a técnica de coloração com azul de bromofenol foi usada para detectar proteína e a reação com Ácido Periódico de Schiff (PAS) foi usada para detectar polissacarídeos. Não foi detectado o DNA de Anaplasma spp., Anaplasma marginale, Babesia/Theileria spp, Bartonella spp., Coxiella spp., Ehrlichia canis, Rickettsia spp. ou Mycoplasma spp. nas células por meio de ensaios de PCR. Além disso,realizamos a caracterização cromossômica das linhagens celulares de ambas as espécies de carrapatos e confirmamos a origem dessas linhagens por meio de PCR convencional e sequenciamento de um fragmento do gene mitocondrial 16S rRNA. Em conclusão, duas novas linhagens celulares derivadas dos embriões de carrapatos foram geradas e caracterizadas neste estudo. Essas linhagens celulares poderão ser usadas em estudos futuros sobre diferentes aspectos, como as relações entre carrapatos e patógenos transmitidos por eles, expressão de proteínas em células infectadas e não infectadas e obtenção de antígenos. Além disso, é importante ter um painel maior de linhagens de células de carrapatos, pois elas podem servir como ferramentas eficientes para o avanço de pesquisas em várias áreas da virologia, bacteriologia, biologia e controle desses carrapatos
- Imprenta:
- Data da defesa: 14.10.2021
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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ABNT
DUARTE, Leidiane Lima. Establishment and characterization of embryonic cell lines of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (RBME-6) and Amblyomma sculptum (ASE-14) (Acari:Ixodida) from Brazil. 2021. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-15032022-101838/. Acesso em: 09 nov. 2024. -
APA
Duarte, L. L. (2021). Establishment and characterization of embryonic cell lines of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (RBME-6) and Amblyomma sculptum (ASE-14) (Acari:Ixodida) from Brazil (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-15032022-101838/ -
NLM
Duarte LL. Establishment and characterization of embryonic cell lines of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (RBME-6) and Amblyomma sculptum (ASE-14) (Acari:Ixodida) from Brazil [Internet]. 2021 ;[citado 2024 nov. 09 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-15032022-101838/ -
Vancouver
Duarte LL. Establishment and characterization of embryonic cell lines of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (RBME-6) and Amblyomma sculptum (ASE-14) (Acari:Ixodida) from Brazil [Internet]. 2021 ;[citado 2024 nov. 09 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-15032022-101838/ - Cultura de células embrionárias de carrapatos do gênero Rhipicephalus para cultivo de Ehrlichia canis e Anaplasma marginale
- Establishment and characterization of a cell line (RBME-6) of Rhipicephalus (Boophilus) microplus from Brazil
- Establishment and multiapproach characterization of Amblyomma sculptum (Acari: Ixodidae) cell line (ASE-14) from Brazil
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.10.2021.tde-15032022-101838 (Fonte: oaDOI API)
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