Expressão e localização celular da diguanilato ciclase DgcP em Pseudomonas aeruginosa (2021)
- Authors:
- Autor USP: BERTOLUCCI JUNIOR, RONALDO - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- DOI: 10.11606/D.46.2021.tde-17012022-173219
- Subjects: PSEUDOMONAS; VIRULÊNCIA
- Keywords: c-di-GMP; c-di-GMP; Fatores de virulência; Pilus tipo IV; Pseudomonas aeruginosa; Pseudomonas aeruginosa; Type IV pilus; Virulence factors
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A bactéria Gram-negativa Pseudomonas aeruginosa é um patógeno oportunista frequentemente associado a vítimas de queimaduras graves ou indivíduos com fibrose cística, sendo os isolados resistentes a carbepenêmicos dessa espécie considerados pela OMS como uma das maiores ameaças ao controle de infecções. O estabelecimento da infecção por esse patógeno é dependente de uma série de fatores de virulência, entre eles o pilus tipo IV (T4P), que possui papel importante na adesão a superfícies e motilidade do tipo twitching, essenciais para a colonização do hospedeiro. Uma das moléculas importantes na diferenciação entre as formas séssil e planctônica de P. aeruginosa é o segundo mensageiro bis-(3,5)-di-guanosina monofosfato cíclico (c-di-GMP), cuja síntese é feita enzimaticamente por diguanilato ciclases (DGCs). DgcP é uma DGC localizada nos polos da célula, que tem sua atividade de síntese de c-di-GMP aumentada na presença da proteína FimV, essencial para a montagem do T4P em P. aeruginosa. Neste trabalho, ensaios de microscopia de fluorescência, organização e expressão gênica foram realizados com o objetivo de aumentar a compreensão sobre o papel de DgcP em relação a sua expressão e aos fatores que regulam o T4P de P. aeruginosa. A proteína DgcP em fusão com mNeonGreen no C-terminal, expressa a partir do locus cromossômico, se localiza de maneira predominantemente bipolar tanto na linhagem selvagem quanto nos mutantes ΔpilA, ΔpilR e ΔchpA, evidenciando que seu padrão de localização não depende dos sistemas de regulação Pil-Chp e PilS-PilR. Ensaios de RT-PCRmostraram que dgcP se encontra em operon com PA14_72430 e dsbA1, indicando um papel celular conjunto entre esses genes, até o momento, desconhecido. Por fim, ensaios de qRT-PCR revelaram que os níveis de mRNA de dgcP são invariáveis nas linhagens WT, ΔpilA, ΔpilR, ΔchpA e ΔfimV, cultivadasem meio líquido ou meio sólido. Os resultados aqui mostrados, combinados com trabalhos prévios do nosso e de outros grupos, sugerem que DgcP é uma diguanilato ciclase responsável por geração constante de c-di-GMP nos polos da célula, possivelmente, atuando na sinalização local dependente do dinucleotídeo cíclico, cuja localização e atividade não são dependentes dos sistemas de regulação que atuam sobre o T4P
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- Data da defesa: 10.11.2021
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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ABNT
BERTOLUCCI JUNIOR, Ronaldo. Expressão e localização celular da diguanilato ciclase DgcP em Pseudomonas aeruginosa. 2021. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-17012022-173219/. Acesso em: 17 out. 2024. -
APA
Bertolucci Junior, R. (2021). Expressão e localização celular da diguanilato ciclase DgcP em Pseudomonas aeruginosa (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-17012022-173219/ -
NLM
Bertolucci Junior R. Expressão e localização celular da diguanilato ciclase DgcP em Pseudomonas aeruginosa [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 17 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-17012022-173219/ -
Vancouver
Bertolucci Junior R. Expressão e localização celular da diguanilato ciclase DgcP em Pseudomonas aeruginosa [Internet]. 2021 ;[citado 2024 out. 17 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-17012022-173219/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.46.2021.tde-17012022-173219 (Fonte: oaDOI API)
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