Tese

Reprogramação celular in vitro à pluripotência (geração de células iPSCs) no modelo suíno a partir da metodologia não transgênica e não invasiva (2020)

• Authors:
  • Recchia, Kaiana
  • Bressan, Fabiana Fernandes (Orientador)
• Autor USP: RECCHIA, KAIANA - FMVZ
• Unidade: FMVZ
• Sigla do Departamento: VCI
• DOI: 10.11606/D.10.2020.tde-06052021-113602
• Subjects: CÉLULAS; SUÍNOS; URINA
• Keywords: iPSCs; Non-Invasive; Swine
• Agências de fomento:
  • Financiamento CAPES
  • Financiamento CNPq
  • Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
    Processo FAPESP: 2019/02811-2
• Language: Português
• Abstract: O suíno é um interessante modelo biomédico por apresentar similaridades imunológicas, anatômicas e fisiológicas com o humano, e, portanto, a reprogramação de células à pluripotência neste modelo é vantajosa para o desenvolvimento de estudos translacionais. A utilização de células de pluripotência induzida (iPSCs) derivadas de células coletadas de forma não invasiva ou menos invasiva pode ser promissora em diversas terapias regenerativas devido à facilidade de obtenção, apesar de ainda não reportada nos animais domésticos. Por essa razão, este estudo tem como objetivos produzir células iPSCs suínas in vitro a partir de células derivadas de urina (urine derived cells ou UDCs) e a partir células mononucleares do sangue periférico (peripheral blood mononuclear cells ou PBMCs), provindas de coleta não invasiva e menos invasiva, respectivamente. Para tal, a urina e o sangue periférico foram coletados de três fêmeas suínas. A partir do sangue coletado foi realizada a separação por gradiente de densidade e a expansão de eritroblastos, entretanto, não foi obtido o número de células necessário para a reprogramação. A partir de amostras de urina processadas, células em cultivo in vitro foram observadas após aproximadamente uma semana. Uma das linhagens isoladas (UDC3) foi submetida ao processo de reprogramação a partir de metodologia integrativa, através de transdução lentiviral com os fatores de transcrição OCT4, SOX2, KLF4 e C-MYC (OSKM, humano ou murino), ou não integrativa,utilizando vetor epissomal, contendo os fatores C-MYC, LIN28, SOX2, KLF4, OCT3/4 e shp53. Foram obtidas colônias reprogramadas derivadas da reprogramação integrativa, das quais isolamos três linhagens de iPSCs clonais (C1, C2 e C3) que se mantiveram em cultivo por pelo menos 28 passagens, demonstrando a capacidade de autorrenovação in vitro. As linhagens foram caracterizadas quanto à detecção de proteínas relacionadas à pluripotência por meio de imunofluorescência, quanto à quantificação de transcritos endógenos e exógenos, e à capacidade de diferenciação em corpos embrioides. Neste estudo foram geradas células suínas reprogramadas a partir de células de urina, o que possibilitará o desenvolvimento de novas tecnologias aplicadas ao modelo suíno beneficiando tanto a produção animal, quanto a ciência básica e translacional, visando sua utilização como modelo biomédico in vivo.
• Imprenta:
  • Publisher place: São Paulo
  • Date published: 2020
• Data da defesa: 17.12.2020

Informações sobre o DOI: 10.11606/D.10.2020.tde-06052021-113602 (Fonte: oaDOI API)
• Este periódico é de acesso aberto
• Este artigo é de acesso aberto
• URL de acesso aberto
• Cor do Acesso Aberto: gold
• Licença: cc-by-nc-sa

---

How to cite

A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

• ABNT

  RECCHIA, Kaiana. Reprogramação celular in vitro à pluripotência (geração de células iPSCs) no modelo suíno a partir da metodologia não transgênica e não invasiva. 2020. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-06052021-113602/. Acesso em: 04 out. 2024.

• APA

  Recchia, K. (2020). Reprogramação celular in vitro à pluripotência (geração de células iPSCs) no modelo suíno a partir da metodologia não transgênica e não invasiva (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-06052021-113602/

• NLM

  Recchia K. Reprogramação celular in vitro à pluripotência (geração de células iPSCs) no modelo suíno a partir da metodologia não transgênica e não invasiva [Internet]. 2020 ;[citado 2024 out. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-06052021-113602/

• Vancouver

  Recchia K. Reprogramação celular in vitro à pluripotência (geração de células iPSCs) no modelo suíno a partir da metodologia não transgênica e não invasiva [Internet]. 2020 ;[citado 2024 out. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-06052021-113602/

Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

• Geração de células-tronco pluripotentes induzidas equinas (eiPSC) a partir de mecanismo epissomal
• Influence of cell type in In vitro induced reprogramming in cattle
• Induced pluripotent stem cells (iPSCs) derived from urine progenitor cells in the swine: a novel non-invasive method for regenerative medicine
• Cattle in vitro induced pluripotent stem cells generated and maintained in 5 or 20% oxygen and different supplementation
• Actions and roles of FSH in germinative cells
• In vitro induced pluripotency from urine-derived cells in porcine
• Porcine germ cells phenotype during embryonic and adult development
• Porcine primordial germ cell-like cells Generated from induced pluripotent stem cells under different culture conditions
• Evaluation of targeted oxidative stress induced by oxygen-ozone in vitro after ischemic induction