Diferenciação de osteoclastos utilizando soro bovino fetal: padronização de método (2021)
- Authors:
- Autor USP: SIPERT, CARLA RENATA - FO
- Unidade: FO
- Subjects: OSTEOCLASTO; REABSORÇÃO DE DENTE
- Language: Português
- Abstract: Introdução: A reabsorção de tecidos ósseos e dentários está associada a uma série de patologias como periodontites e reabsorções dentárias. O estudo da osteoclastogênese in vitro é fundamental para a compreensão de mecanismos envolvidos com estas patologias. Métodos clássicos utilizam monócitos do sangue periférico sob diferenciação em osteoclastos por meio da ação do Ligante do Receptor Ativador de NF-κB (RANKL) e do Fator Estimulador de Colônias de Macrófagos (M-CSF). Todavia, o emprego de soro humano dificulta sua viabilidade na rotina laboratorial. Objetivo: Padronizar o método de diferenciação osteoclástica in vitro utilizando soro bovino fetal (SBF). Material e método: Mononucleares de Sangue Periférico (PBMC) humanos foram isolados a partir de protocolo padrão (diluição em PBS e separação com gradiente). PBMC foram recuperadas e semeadas em α-MEM suplementado com 30% de SBF. Parte da cultura foi estimulada com M-CSF e RANKL recombinantes humanos. A incubação seguiu por 21 dias a 5% de CO2 e 37oC com trocas de meio semanais. A diferenciação celular foi avaliada por meio da visualização de células multinucleadas em contraste de fases e pela coloração com panótico rápido além da detecção de anéis de actina por fluorescência. Resultados: Após 21 dias de cultura, somente as células sob diferenciação se apresentaram multinucleadas e positivas para a presença de anéis de actina. Conclusão: O SBF pode ser utilizado em culturas para diferenciação de PBMC em osteoclastos em substituição ao uso de soro de origem humana, desde que associados aos fatores RANKL e M-CSF
- Imprenta:
- Source:
- Título: Clinical and Laboratory Research and Dentistry
- ISSN: 2357-8041
- Volume/Número/Paginação/Ano: 2021
- Conference titles: Reunião de Pesquisa
-
ABNT
RAHHAL, Juliana Garuba e SIPERT, Carla Renata. Diferenciação de osteoclastos utilizando soro bovino fetal: padronização de método. Clinical and Laboratory Research and Dentistry. São Paulo: Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo. . Acesso em: 10 out. 2024. , 2021 -
APA
Rahhal, J. G., & Sipert, C. R. (2021). Diferenciação de osteoclastos utilizando soro bovino fetal: padronização de método. Clinical and Laboratory Research and Dentistry. São Paulo: Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo. -
NLM
Rahhal JG, Sipert CR. Diferenciação de osteoclastos utilizando soro bovino fetal: padronização de método. Clinical and Laboratory Research and Dentistry. 2021 ;[citado 2024 out. 10 ] -
Vancouver
Rahhal JG, Sipert CR. Diferenciação de osteoclastos utilizando soro bovino fetal: padronização de método. Clinical and Laboratory Research and Dentistry. 2021 ;[citado 2024 out. 10 ] - Produção de MIP-lalfa e SDF-1 por fibroblastos de polpa dental humana em cultura frente ao desafio com Enterococcus faecalis inativado por calor
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