Prevalência de beta-talassemias em pacientes com anemia falciforme em quatro estados do Brasil (2020)
- Authors:
- Autor USP: MARTINO, CAMILA CRUZ DE - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MTD
- Subjects: ANEMIA FALCIFORME; SEQUENCIAMENTO GENÉTICO; HEMOGLOBINAS; ANEMIA; BIOLOGIA MOLECULAR
- Keywords: Anemia, Molecular biology; Genetic sequencing; Hemoglobins; Sickle cell; Talassemia, Anemia; Thalasssemia
- Language: Português
- Abstract: O diagnóstico da doença falciforme (DF) é feito por ensaios de hemoglobina (Hb), como cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), foco isoelétrico e eletroforese em acetato de celulose ou ágar citrato. Esses ensaios são de fácil execução e utilizados em exames de recém-nascidos em larga escala em muitos países. No entanto, esses testes podem não diferenciar facilmente a talassemia S?0 da SS ou identificar outras variantes da hemoglobina e, nesse caso, o sequenciamento genético do gene da beta globina (HBB) pode ser necessário. Com o objetivo de desenvolver um ensaio confirmatório com base no ácido desoxirribonucleico (DNA) de alta produtividade para DF e detectar mutações no gene HBB. Métodos: Desenvolveu-se uma técnica de pyrosequencimento automático (Pyro) de acordo com a tecnologia Qiagen (Hilden, Alemanha) para detectar mutações homozigotas ou heterozigotas da hemoglobina S (HbS), bem como mutações na hemoglobina C (HbC). A técnica foi testada em 2.748 amostras de pacientes inscritos em uma coorte multicêntrica da DF no Brasil. Os pacientes foram previamente testados usando HPLC para diagnosticar DF como parte dos cuidados clínicos de rotina. Quaisquer indivíduos com resultados discrepantes entre HPLC e Pyro ou com hemoglobina S (HbS) heterozigótica detectada realizaram sequenciamento de Sanger do gene HBB. Resultados: Foram identificadas 168 amostras com resultados discrepantes entre HPLC e Pyro e 100 com Pyro concordante = S heterozigótico e HPLC, o que sugeriria talassemia S?ou outras variantes S heterozigóticas. O ensaio Pyro identificou corretamente 1.906 (98,7%) das HbSS de 1.930 amostras e 628 (98,7%) das 636 amostras de Hemoglobinopatia SC (HbSC). Das 179 amostras restantes, o Pyro indicou corretamente heterozigose S em 165 (92,2%). Das 165 amostras heterozigotas de S confirmadas por Sanger como consistentes com o genótipo de talassemia S?, 84 amostras foram classificadas como talassemia S?0 e 81 como talassemia S?+. As mutações beta talassêmicas mais frequentes de S?0 e S?+ foram HBB:c.118C>T (Gln40Stop) e HBB:c.92+6T>C, respectivamente. Discussão: O Pyro provou ser satisfatório para testes confirmatórios em larga escala da mutação da hemoglobina. Além disso, este estudo possibilitou a descrição das mutações ?+ e ?0 mais comuns em pacientes com DF com S- talassemia em uma grande coorte multi-institucional de DF no Brasil
- Imprenta:
- Data da defesa: 06.07.2020
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ABNT
MARTINO, Camila Cruz de. Prevalência de beta-talassemias em pacientes com anemia falciforme em quatro estados do Brasil. 2020. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-10082021-172251/. Acesso em: 02 maio 2025. -
APA
Martino, C. C. de. (2020). Prevalência de beta-talassemias em pacientes com anemia falciforme em quatro estados do Brasil (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-10082021-172251/ -
NLM
Martino CC de. Prevalência de beta-talassemias em pacientes com anemia falciforme em quatro estados do Brasil [Internet]. 2020 ;[citado 2025 maio 02 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-10082021-172251/ -
Vancouver
Martino CC de. Prevalência de beta-talassemias em pacientes com anemia falciforme em quatro estados do Brasil [Internet]. 2020 ;[citado 2025 maio 02 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-10082021-172251/
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