Identificação das variantes dos genes RHD e RHCE em pacientes com doença falciforme usando estratégia de sequenciamento de nova geração (2020)
- Authors:
- Autor USP: RIBEIRO, INGRID HELENA - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MTD
- Subjects: ANTÍGENOS; ANEMIA FALCIFORME; SISTEMA DO GRUPO SANGUÍNEO RH-HR
- Keywords: Anemia sickle cell; Antígenos de grupos sanguíneos; Blood groups antigens; Genotipagem eritrocitária; Genotyping techniques; High-throughput nucleotide sequencing; Rh-Hr blood group system; Sequenciamento de nucleotídeos em larga escala
- Language: Português
- Abstract: Introdução: Os antígenos eritrocitários do sistema de grupo sanguíneo RH são codificados por dois genes altamente homólogos, RHD e RHCE, sendo que os rearranjos gênicos são responsáveis pelas variantes de antígenos por eles codificados. A complexidade dessa variação genética, principalmente em pacientes em regime crônico de transfusão, como aqueles com a doença falciforme (DF), contribui para elevada taxa de aloimunização eritrocitária. Os ensaios moleculares convencionais não conseguem identificar todas as variantes genéticas já descritas para o locus RH, bem como prever novos alelos. O sequenciamento de RHD e RHCE é indicado para ampliar a pesquisa de variantes genéticas de Rh. OBJETIVOS: 1) Padronizar a estratégia de sequenciamento de nova geração (Next Generation Sequencing - NGS) para identificar assertivamente variantes genéticas de Rh entre pacientes com DF com suspeita sorológica de variantes de Rh. 2) Correlacionar dados genéticos com a classificação sorológica dos anticorpos RH não esperados (direcionados contra antígenos para os quais a fenotipagem eritrocitária é positiva). MÉTODOS: Trinta e cinco pacientes com DF com anticorpos RH não esperados foram incluídos. Estratégia de NGS foi desenvolvida para genotipar RHD e RHCE usando primers gene-específicos. Os dados genotípicos e sorológicos foram comparados. RESULTADOS: Os dados obtidos no ensaio de NGS foram específicos para os genes RHD e RHCE. Dez e vinte e cinco alelos variantes de RHD e RHCE foram identificados, respectivamente. Entre todos os casos de anticorpos RH não esperados, 62% foram classificados de maneira imprecisa por análise sorológica e, dentre esses casos, 73,1% foram considerados como potencialmente prejudiciais ao paciente, visto que a classificação inacurada do anticorpo como autoou alo poderia se associar a aumento do risco de reações hemolíticas pós-transfusionais ou falta de unidades de tipo O RhD negativo para transfusão. Encontrados dois novos alelos não descritos na literatura, ainda necessitando de ensaios sorológicos no intuito de determinar se esses codificam antígenos parciais. CONCLUSÃO: O ensaio NGS projetado para genotipar regiões codificadoras de RH foi eficaz e preciso na identificação de variantes. A estratégia proposta esclareceu o fenótipo Rh da maioria dos pacientes, melhorando o suporte à transfusão
- Imprenta:
- Data da defesa: 15.12.2020
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ABNT
RIBEIRO, Ingrid Helena. Identificação das variantes dos genes RHD e RHCE em pacientes com doença falciforme usando estratégia de sequenciamento de nova geração. 2020. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-23082021-103036/. Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Ribeiro, I. H. (2020). Identificação das variantes dos genes RHD e RHCE em pacientes com doença falciforme usando estratégia de sequenciamento de nova geração (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-23082021-103036/ -
NLM
Ribeiro IH. Identificação das variantes dos genes RHD e RHCE em pacientes com doença falciforme usando estratégia de sequenciamento de nova geração [Internet]. 2020 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-23082021-103036/ -
Vancouver
Ribeiro IH. Identificação das variantes dos genes RHD e RHCE em pacientes com doença falciforme usando estratégia de sequenciamento de nova geração [Internet]. 2020 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5179/tde-23082021-103036/
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