Avaliação in vitro dos efeitos da exposição crônica ao carcinógeno4-(methylnitrosamino)-1-(-3-pyridyl)-1-butanone(NNK) em hepatócitos murinos (2020)
- Authors:
- Autor USP: MIZUSAKA, ANDRÉA MIDORY MIYAKE - Interunidades em Biotecnologia
- Unidade: Interunidades em Biotecnologia
- Assunto: XXX
- Keywords: cigarette; cigarro; hepatócitos murinos; murine hepatocytes; Nitrosaminas; Nitrosamines; NNK; NNK; Smoking; Tabagismo
- Language: Português
- Abstract: Existem mais de 7000 substâncias químicas no cigarro, sendo que, destas cerca de 70 substâncias são consideradas carcinógenos. Uma delas é o 4- (metilnitrosamino) -1 - (- 3-piridil) -1-butanona) ou NNK. Já é bem estabelecido que o NNK pode causar danos às células pulmonares, bem como às células da mama in vitro, e pode levar à formação de danos no DNA. O fígado é um dos órgãos responsáveis pelo seu metabolismo e entender qual o papel desse carcinógeno nos hepatócitos é muito importante, porém pouco se sabe sobre como esse carcinógeno atua na célula in vitro. Para isso, adotamos uma abordagem de exposição repetida para avaliar quais alterações e efeitos celulares ocorrem na linhagem AML12 de hepatócitos murinos imortalizados. As células AML12 foram expostas ao NNK por 30 ciclos, em diferentes concentrações, e o comportamento celular foi avaliado após a exposição a longo prazo. Na análise de citometria celular, o grupo exposto a 0,1 nM apresentou maior índice proliferativo, maior capacidade de invasão no ensaio de invasão transwell e maior sobrevivência quando cultivado em superfície de baixa adesão. No entanto, os testes de tumorigenicidade in vivo não mostraram crescimento tumoral, após a inoculação das células em camundongos imunodeficientes. No ensaio de exposição de curto prazo com MTT, as células apresentaram um aumento na viabilidade célular em 0,1 nM e 10 nM de NNK. No ensaio de wound healing, as células expostas a 10nM NNK por longo prazo apresentaram um fechamentomais rápido da lesão. O tempo de duplicação não mostrou diferença significativa. Nos ensaios de imunofluorescência, as células submetidas à exposição de longo prazo ao NNK apresentaram marcação para K-RAS, p53, C-Myc e ß-catenina. Nas análises de genotoxicidade, o teste do cometa que nos mostrou que as células AML12 tratadas com 10nM de NNK apresentaram maior escore em relação ao grupo controle, indicando uma maior quantidade de quebras de fita de DNA. O ensaio do micronúcleo mostra que não houve diferença estatística nas células expostas ao NNK em comparação com o grupo controle. Concluímos dizendo que, mesmo em baixas concentrações, NNK pode comprometer a dinâmica celular após exposição de longo prazo, mas alguns aspectos permanecem obscuros e requerem maiores estudos para sua elucidação
- Imprenta:
- Data da defesa: 11.12.2020
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ABNT
MIZUSAKA, Andréa Midory Miyake. Avaliação in vitro dos efeitos da exposição crônica ao carcinógeno4-(methylnitrosamino)-1-(-3-pyridyl)-1-butanone(NNK) em hepatócitos murinos. 2020. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-28042021-101613/. Acesso em: 22 jan. 2026. -
APA
Mizusaka, A. M. M. (2020). Avaliação in vitro dos efeitos da exposição crônica ao carcinógeno4-(methylnitrosamino)-1-(-3-pyridyl)-1-butanone(NNK) em hepatócitos murinos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-28042021-101613/ -
NLM
Mizusaka AMM. Avaliação in vitro dos efeitos da exposição crônica ao carcinógeno4-(methylnitrosamino)-1-(-3-pyridyl)-1-butanone(NNK) em hepatócitos murinos [Internet]. 2020 ;[citado 2026 jan. 22 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-28042021-101613/ -
Vancouver
Mizusaka AMM. Avaliação in vitro dos efeitos da exposição crônica ao carcinógeno4-(methylnitrosamino)-1-(-3-pyridyl)-1-butanone(NNK) em hepatócitos murinos [Internet]. 2020 ;[citado 2026 jan. 22 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-28042021-101613/
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