Transplante intravítreo de células tronco mesenquimais humanas. Estudo de viabilidade em olhos de coelhos e de segurança em pacientes com glaucoma avançado (2019)
- Authors:
- Autor USP: VILELA, CAROLINA ASSIS PEREIRA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: ROO
- Subjects: GLAUCOMA; CÉLULAS-TRONCO; BIOLUMINESCÊNCIA
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: Avaliar, em modelo experimental, a viabilidade das células tronco mesenquimais (CTM) injetadas na cavidade vítrea de coelhos pelo método da bioluminescência (BLI) (estudo 1); e investigar as alterações oculares induzidas pelo tratamento com CTM, autólogas, infundidas na cavidade vítrea de pacientes com glaucoma avançado (estudo 2). Casuística e Métodos: Estudo 1: No modelo animal, um vetar lentiviral recombinante expressando a luciferase-2 (Luc2) foi incubado com CTM de doadores humanos, anteriormente à injeção intraocular. Dezoito olhos direitos de dezoito coelhos New Zealand, fêmeas adultas, foram avaliados por BLI após receberem 1x10^6 CTM modificadas intravítreo para expressão da Luc. Os olhos contralaterais foram usados como controle e receberam injeção intravítrea de solução salina balanceada (PBS). Nos seis tempos programados (8 horas, 1, 2, 30 e 60 dias após as injeções), D-luciferina (40mg/ml, 300 µL PBS) foi injetada intravítreo nos olhos enucleados, em ambos os grupos. As leituras subsequentes foram realizadas pela BLI (Ivis Lumina, Caliper Life Sciences). Adicionalmente, realizou-se a pesquisa da expressão dos antígenos CD90 e CD73 por imunofluorescência, nos olhos de coelhos enucleados, após 30 dias da infusão celular. Estudo 2: Ensaio clínico de segurança envolvendo pacientes com glaucoma primário de ângulo aberto submetidos à injeção intravitrea de 1x10^6 CTM no olho de pior visão (melhor acuidade visual corrigida <0,1). Os participantes foram avaliados por 12 meses para detecção de eventual melhora da função visual, ou presença de complicações oculares, com os seguintes exames: medida da acuidade visual (AV), eletrorretinograma, tomografia de coerência óptica, angiofluoresceinografia e perimetria visual. Resultados: Estudo 1: Os olhos injetados com CTM apresentaram altos níveis de radiância imediatamente após ainfusão da D-luciferina com decaimento progressivo até a leitura com 60 dias. As médias da BLI nos olhos injetados com CTM foram significativamente maiores do que nos olhos controle nas leituras realizadas com oito até 30 dias após a injeção. Positividade na análise por imunofluorescência para os antígenos CD90 e CD73 foi observada no 30° dia pós-infusão, exclusivamente na cavidade vítrea dos coelhos injetados com CTM. Estudo 2: Dois pacientes completaram os 12 meses de seguimento, sendo que o paciente 1 apresentou descolamento de retina no trigésimo dia e manteve a AV de percepção luminosa prévia, após abordagem cirúrgica (vitrectomia via pars plana). O paciente 2 não apresentou complicações, nem alterações significativas da função visual e dos exames estruturais realizados. Conclusões: A BLI confirmou-se como método eficaz na monitorização longitudinal da viabilidade celular em modelo experimental de injeção intravítrea de CTM. Todavia, a ausência de melhora visual e a complicação, observadas no ensaio clínico de segurança, indicam a necessidade de novos estudos utilizando CTM modificadas geneticamente em doenças oculares, particularmente o glaucoma
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2019
- Data da defesa: 09.05.2019
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ABNT
VILELA, Carolina Assis Pereira. Transplante intravítreo de células tronco mesenquimais humanas. Estudo de viabilidade em olhos de coelhos e de segurança em pacientes com glaucoma avançado. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2019. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Vilela, C. A. P. (2019). Transplante intravítreo de células tronco mesenquimais humanas. Estudo de viabilidade em olhos de coelhos e de segurança em pacientes com glaucoma avançado (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Vilela CAP. Transplante intravítreo de células tronco mesenquimais humanas. Estudo de viabilidade em olhos de coelhos e de segurança em pacientes com glaucoma avançado. 2019 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Vilela CAP. Transplante intravítreo de células tronco mesenquimais humanas. Estudo de viabilidade em olhos de coelhos e de segurança em pacientes com glaucoma avançado. 2019 ;[citado 2024 abr. 19 ]
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