Tese

Pele humana como modelo ex vivo para manutenção do bacilo Mycobacterium leprae (2019)

• Authors:
  • Paula, Natalia Aparecida de
  • Frade, Marco Andrey Cipriani (Orientador)
• Autor USP: PAULA, NATALIA APARECIDA DE - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RBP
• Subjects: MYCOBACTERIUM LEPRAE; HANSENÍASE
• Language: Português
• Abstract: Mycobacterium leprae (M. leprae), descrito como causador da hanseníase em 1873, ainda hoje não há meios de cultivá-lo artificialmente in vitro, sendo que atualmente a única forma de mantêlo viável e replicando-se é a inoculação in vivo, principalmente em camundongos nude, porém trata-se de um modelo in vivo, trabalhoso e demorado. Esse trabalho propõe padronizar o cultivo do M. leprae, em modelo ex vivo, a partir de explantes de pele humana (hOSEC - human organotypic skin explant culture) tanto para ensaios laboratoriais quanto para auxílio clínico. Para isso, M. leprae, cepa Thai-53, obtido de camundongos nude, foi inoculado em fragmentos de pele humana e mantidos em placas com meio de cultura DMEM, a 5% de CO2. A manutenção, crescimento e morfologia dos bacilos nos explantes foram avaliadas após os períodos de cultura (4, 7, 14, 28 e 60 dias) por coloração de Fite-Faraco (FF) e por biologia molecular (RLEP/16s rRNA). Após 28 e 60 dias de cultura, bacilos foram recuperados dos explantes e inoculados na pata de camundongo nude para avaliar manutenção da viabilidade e infectividade. À coloração FF, bacilos foram encontrados em todos os tempos nas formas bacilar íntegra e fragmentada, isolados ou formando alguns aglomerados e raras globias. A viabilidade bacilar foi demonstrada pela positividade da RT-PCR para 16s rRNA em todos os explantes em todo o período de cultura. Dentre os animais inoculados com os bacilos previamente cultivados nos explantes por 28 e 60 dias, apósmanutenção por 5 meses, 28,4% apresentaram-se positivos para os bacilos, em pelo menos uma das técnicas utilizadas, FF (31,8%), Zihel-Neelsen em suspensão de macerado da pata (77,3%) e RT-PCR (45%). Suspensão de bacilos oriundas de raspados dérmicos e hansenomas de pacientes, foram inoculadas nos explantes e cultivados da mesma maneira já citada, mantendose positivas ao FF e RT-PCR após cultivo médio de 28 dias. Os bacilos de amostras clínicas também foram recuperados dos explantes e inoculados nos camundongos e também apresentaram positividade após cinco meses de manutenção in vivo. Pela primeira vez na literatura, nossos 9 resultados demonstraram com sucesso que é possível manter o M. leprae viável no modelo de pele humana ex vivo por até 60 dias, tanto a partir de amostras laboratoriais quanto clínicas, importante passo no desenvolvimento de modelos experimentais para estudos da biologia do M. leprae e suas interações, além de clínicos, como imunologia e susceptibilidade a drogas
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 2019
• Data da defesa: 11.07.2019


---

How to cite

A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

• ABNT

  PAULA, Natalia Aparecida de. Pele humana como modelo ex vivo para manutenção do bacilo Mycobacterium leprae. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2019. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-04102019-104640/. Acesso em: 29 dez. 2025.

• APA

  Paula, N. A. de. (2019). Pele humana como modelo ex vivo para manutenção do bacilo Mycobacterium leprae (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-04102019-104640/

• NLM

  Paula NA de. Pele humana como modelo ex vivo para manutenção do bacilo Mycobacterium leprae [Internet]. 2019 ;[citado 2025 dez. 29 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-04102019-104640/

• Vancouver

  Paula NA de. Pele humana como modelo ex vivo para manutenção do bacilo Mycobacterium leprae [Internet]. 2019 ;[citado 2025 dez. 29 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-04102019-104640/

Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

• Cross-sectional screening study for Leishmania DNA and antibodies in biologic-treated patients with psoriasis living in an area endemic for leishmaniasis. [Carta]
• Clinical manifestation, dermoscopy, and scanning electron microscopy in two cases of contagious ecthyma (orf nodule)
• Pemphigus foliaceus and sand fly bites. [Carta]: assessing the humoral immune response to the salivary proteins maxadilan and LJM11
• Development and validation of a machine learning approach for screening new leprosy cases based on the leprosy suspicion questionnaire
• Autoantibodies against desmoglein 2 are not pathogenic in pemphigus
• Leprosy case series in the emergency room: a warning sign for a challenging diagnosis
• Ex vivo model of human skin (hOSEC) for assessing the dermatokinetics of the anti-melanoma drug dacarbazine
• Innovative tracking, active search and follow-up strategies for new leprosy cases in the female prison population
• Active search strategies, clinicoimmunobiological determinants and training for implementation research confirm hidden endemic leprosy in inner São Paulo, Brazil
• Bacilloscopy and polymerase chain reaction of slit-skin smears and anti-phenolic glycolipid-I serology for Hansen’s disease diagnosis