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Tese

Caracterização do secretoma de cepas de Xylella fastidiosa (2017)

  • Authors:
  • Autor USP: FEITOSA JUNIOR, OSÉIAS RODRIGUES - IQ
  • Unidade: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Subjects: FITOPATÓGENOS; CLOROSE VARIEGADA DOS CITROS
  • Agências de fomento:
  • Language: Português
  • Abstract: As doenças causadas pelo fitopatógeno Xylella fastidiosa, uma bactéria Gram-negativa, devem-se aos seus múltiplos fatores de virulência, tais como formação de biofilme, secreção de enzimas de degradação da parede celular do xilema (CWDE), expressão de proteínas de adesão e produção de vesículas de membrana externa (OMVs). Esses fatores de virulência são controlados por uma via de sinalização mediada por DSF (fatores de sinalização difusíveis de natureza lipídica) e relacionada com percepção de quórum. Nesse trabalho, tivemos como objetivo ampliar a caracterização do secretoma de cepas selvagens e mutantes de X. fastidiosa para evidenciar proteínas e metabólitos potencialmente associados à adaptação ao hospedeiro, virulência e patogenicidade. Desenvolvemos, paralelamente, três estudos empregando como abordagens metodológicas a proteômica, a metabolômica e a transcritômica. No primeiro estudo, comparamos o secretoma (exoproteoma) da cepa Temecula1 selvagem (WT) e do mutante no gene da sintase de DSF (ΔrpfF), o qual exibe fenótipo de hipervirulência em videiras. A este estudo associamos a comparação dos transcritomas dessas cepas. Os resultados mostraram que, mesmo no cultivo in vitro, X. fastidiosa expressa e secreta fatores de virulência previamente conhecidos (lipases-esterases e proteases), além de toxinas (microcinas) que, supostamente, teriam papel de controlar bactérias competidoras pelo mesmo nicho. No segundo estudo caracterizamos a composição de OMVs secretadas no cultivo in vitro por X. fastidiosa Fb7 e 9a5c (cepas isoladas de laranjeiras) e Temecula1 (cepa isolada de videira). Demonstramos que Fb7 produz até 57% mais OMVs que 9a5c e Temecula1 e identificamos um total de 202 proteínas distintas nas OMVs produzidas pelas 3 cepas, ampliando consideravelmente o número de proteínas secretadas por meio de OMVs descrito, até então, para X. fastidiosa. Entreas proteínas enriquecidas, citamos adesinas afimbriais, porinas, lipoproteínas, hidrolases (lipases/esterases, proteases e peptidases) e uma pectina-liase putativa. Destacamos a detecção da enzima L-ascorbato oxidase nas OMVs e sugerimos que esta enzima poderia atuar na depleção do ascorbato produzido pelo hospedeiro vegetal. Além disso, demonstramos, pela primeira vez, que OMVs de X. fastidiosa transportam ácidos graxos da família DSF, sugerindo um papel adicional para OMVs nesse fitopatógeno. Finalmente, no terceiro estudo verificamos alterações relevantes no perfil de metabólitos secretados por X. fastidiosa em resposta a sua interação com metabólitos secretados por Burkholderia phytofirmans, proposta como uma cepa para o biocontrole da doença de Pierce de videiras. Confirmamos que o sobrenadante de B. phytofirmans possui um composto de natureza apolar que induz a formação de biofilme em X. fastidiosa, contudo ainda não foi possível decifrar a natureza química deste composto
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 26.10.2017
    • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      FEITOSA JUNIOR, Oséias Rodrigues. Caracterização do secretoma de cepas de Xylella fastidiosa. 2017. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2017. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-24102019-151624/. Acesso em: 05 jun. 2025.

    • APA

      Feitosa Junior, O. R. (2017). Caracterização do secretoma de cepas de Xylella fastidiosa (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-24102019-151624/

    • NLM

      Feitosa Junior OR. Caracterização do secretoma de cepas de Xylella fastidiosa [Internet]. 2017 ;[citado 2025 jun. 05 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-24102019-151624/

    • Vancouver

      Feitosa Junior OR. Caracterização do secretoma de cepas de Xylella fastidiosa [Internet]. 2017 ;[citado 2025 jun. 05 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-24102019-151624/

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