Caracterização e avaliação da atividade enzimática da toxina tetânica submetida à radiação gama por Cobalto 60 (2019)
- Authors:
- Autor USP: DAMIÃO, GISELLE PACIFICO SARTORI - IMT
- Unidade: IMT
- Subjects: CLOSTRIDIUM TETANI; TÉTANO; TOXINAS; RADIAÇÃO GAMA; PROTEÍNAS
- Language: Português
- Abstract: O tétano é uma doença aguda de alta letalidade que acomete os terminais nervosos impedindo a liberação de neurotransmissores inibitórios. Considerada uma das toxinas microbianas mais potentes, o tétano ainda é um grave problema de saúde pública em países subdesenvolvidos e sua principal forma de prevenção se dá através da imunização. A vacina antitetânica é produzida a partir da inativação da TeNT por formaldeído e pode causar diversos efeitos adversos. Uma alternativa atualmente estudada é o uso da radiação ionizante para a diminuição da toxicidade de proteínas melhorando sua capacidade imunogênica e reduzindo reações adversas pós-vacinais. A partir disso, o presente trabalho teve como objetivo caracterizar o efeito da radiação ionizante na estrutura da toxina tetânica submetida a diferentes doses de radiação gama por Cobalto 60 e analisar a atividade enzimática residual após a exposição à radiação. A modificação estrutural na toxina tetânica após a radiação foi determinada por SDS PAGE, que evidenciou uma modificação gradual no perfil das proteínas com perda no volume da banda conforme o aumento da dose e o surgimento de bandas a partir da dose de 5 kGy. A análise por MALDI-TOF demonstrou fragmentações nas massas moleculares conforme o aumento da dose e possíveis agregações de fragmentos proteicos em doses mais elevadas. Na análise da preservação dos peptídeos por digestão enzimática e espectrometria de massa, houve uma discreta modificação no reconhecimento até a dose de 4 kGy, nas doses subsequentes, o reconhecimento foi mínimo. A análise da atividade enzimática residual por fluorescência demonstrou preservação de 65% da atividade mesmo em doses mais elevadas.Na avaliação antigênica realizada por ELISA e Western Blot, foi possível observar o reconhecimento de anticorpos anti-TeNT frente às toxinas irradiadas nas diferentes doses, com queda gradual conforme o aumento da dose, mas permanecendo com níveis satisfatórios em todas as doses. Nossos dados sugerem que a radiação ionizante promoveu alterações estruturais na toxina tetânica, promovendo fragmentação e/ou agregação com o aumento da dose, porém também foi possível observar que a radiação atenuou a atividade enzimática e que seu reconhecimento antigênico mesmo em doses mais elevadas permaneceu com bons níveis o que indica a possibilidade de um possível uso como imunógeno, contudo, estudos da atividade enzimática sobre doses mais elevadas necessitam serem realizados.
- Imprenta:
- Data da defesa: 07.08.2019
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ABNT
SARTORI, Giselle Pacifico. Caracterização e avaliação da atividade enzimática da toxina tetânica submetida à radiação gama por Cobalto 60. 2019. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. . Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Sartori, G. P. (2019). Caracterização e avaliação da atividade enzimática da toxina tetânica submetida à radiação gama por Cobalto 60 (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Sartori GP. Caracterização e avaliação da atividade enzimática da toxina tetânica submetida à radiação gama por Cobalto 60. 2019 ;[citado 2024 abr. 18 ] -
Vancouver
Sartori GP. Caracterização e avaliação da atividade enzimática da toxina tetânica submetida à radiação gama por Cobalto 60. 2019 ;[citado 2024 abr. 18 ]
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