Indução da pluripotência celular e diferenciação in vitro no modelo suíno como modelo translacional (2018)
- Authors:
- Autor USP: MACHADO, LUCAS SIMÕES - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VCI
- Subjects: SUÍNOS; REPROGRAMAÇÃO NUCLEAR; CÉLULAS-TRONCO
- Keywords: Cellular reprogramming; Células pluripotentes induzidas (iPSCs); Células progenitoras neurais; Induced pluripotent stem cells (iPSCs); Neural progenitor cells; Porcine; Reprogramação celular; Suíno; Swine
- Agências de fomento:
- Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
- Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Processo FAPESP: 2015/26818-5 - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Processo FAPESP: 2017/02159-8 - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Processo FAPESP: 2017/13973-8
- Language: Português
- Abstract: Em 2006, Takahashi e colaboradores demonstraram ser possível a obtenção de células-tronco pluripotentes por indução gênica (induced pluripotent stem cells ou iPSCs). Desde o surgimento desta tecnologia diversos modelos animais foram gerados, ampliando as possibilidades de seu uso na pesquisa, como por exemplo, na criação de modelos para doenças genéticas humanas como esclerose lateral amiotrófica, autismo, esquizofrenia, doença de Parkinson e Alzheimer, além do aprimoramento de características relevantes para produção animal. O modelo suíno é considerado vantajoso sobre os outros modelos animais principalmente pela criação já bem estabelecida e similaridades fisiológicas com os humanos. O intuito deste projeto foi reprogramar fibroblastos embrionários suínos através do sistema integrativo à iPSCs, para então diferenciá-las em células progenitoras neurais (neural progenitor cells, NPCs). Para isso, os fibroblastos foram transduzidos com vetores contendo sequencias humanas ou murinas dos genes OCT4, SOX2, c-Myc e KLF4 (hOSKM ou mOSKM) para formação das iPSCs. Estas foram caracterizadas quanto a morfologia, presença de fosfatase alcalina, a expressão dos genes exógenos e endógenos (OSKM, HS OCT4, OCT4, NANOG) através de imunofluorescência e RT-qPCR e formação de corpos embrióides. Então foram submetidas durante 14 dias ao meio de indução neural sob matriz extracelular comercial, gerando células potencialmente similares às NPCs. Estas foram caracterizadas morfologicamente, porimunofluorescência das proteínas NESTINA, BETA TUBULINA III e VIMENTINA, além da expressão de NESTINA e GFAP por RT-qPCR. Foram produzidas com sucesso 3 linhagens de iPSC em diferentes estágios de reprogramação e células positivas para todos os marcadores neurais testados. Os resultados apresentados deverão contribuir para a utilização do modelo suíno em futuros estudos voltados à medicina regenerativa e translacional
- Imprenta:
- Data da defesa: 20.12.2018
-
ABNT
MACHADO, Lucas Simões. Indução da pluripotência celular e diferenciação in vitro no modelo suíno como modelo translacional. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062019-095120/. Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Machado, L. S. (2018). Indução da pluripotência celular e diferenciação in vitro no modelo suíno como modelo translacional (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062019-095120/ -
NLM
Machado LS. Indução da pluripotência celular e diferenciação in vitro no modelo suíno como modelo translacional [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062019-095120/ -
Vancouver
Machado LS. Indução da pluripotência celular e diferenciação in vitro no modelo suíno como modelo translacional [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-13062019-095120/
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
