Tese

Efeito das células endoteliais mediadas pelo LTB4 em células ósseas (2019)

• Authors:
  • Domezi, João Paulo
  • Oliveira, Rodrigo Cardoso de (Orientador)
• Autor USP: DOMEZI, JOãO PAULO - FOB
• Unidade: FOB
• Sigla do Departamento: BAE
• Subjects: CÉLULAS ENDOTELIAIS; CÉLULAS DO OSSO; LEUCOTRIENOS; OSTEOGÊNESE
• Keywords: Angiogênese; Angiogenesis; Leucotrienos; Leukotrienes; LTB4; LTB4; Osteogênese; Osteogenesis; VEGF; VEGF
• Agências de fomento:
  • Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
    Processo FAPESP: 2016/08890-3
• Language: Português
• Abstract: Os vasos sanguíneos são formados, entre outros componentes, por células endoteliais as quais fazem parte da microvasculatura óssea e são capazes de regular o desenvolvimento ósseo tendo em vista de que os processos de osteogênese e angiogênese estão interligados. Os leucotrienos (LTs) são mediadores lipídicos envolvidos no recrutamento de leucócitos e na regulação da síntese de citocinas. O tratamento com o leucotrieno B4 (LTB4) induz a angiogênese pela superexpressão do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). Assim, o objetivo do trabalho foi investigar o efeito das células endoteliais reguladas pelo LTB4 na diferenciação osteogênica. Para isso, células endoteliais primárias de aorta foram isoladas e cultivadas por até 4 dias e, quando apropriado, foi realizado o tratamento das mesmas com o LTB4. O meio condicionado das células endoteliais foi armazenado para os experimentos com osteoblastos. Células osteoblásticas foram isoladas da calvária e cultivadas por até 21 dias, avaliando-se, portanto, os efeitos das células endoteliais reguladas ou não pelo LTB4 e a resposta dos estímulos exógenos LTB4, o inibidor da síntese de LTs MK 886 e o antagonista do receptor do LTB4, o U75302. Tais respostas foram observadas na fase de crescimento celular, por meio da viabilidade, proliferação e produção de marcadores osteogênicos e angiogênicos como o RANKL, OPG e o VEGF por meio da redução do MTT, citometria de fluxo e western blotting, respectivamente. A diferenciação foi avaliada por meio dos ensaios de fosfatase alcalina (ALP) e expressão gênica por meio de ensaio enzimático e qRT-PCR e mineralização por Vermelho de alizarina. Resultados mostraram que tanto as células endoteliais, mediadas ou não pelo LTB4, quanto os estímulos exógenos não foram capazes de modular a proliferação dos osteoblastos.Porém, durante a diferenciação, o LTB4 inibiu a atividade da ALP, a expressão gênica do BLT1, ALP, BGLAP (osteocalcina) e OPG (osteoprotegerina) foi aumentada, e os genes RANKL e VEGF tiveram a sua expressão diminuída pelo tratamento com o meio condicionado das células endoteliais, mediadas ou não pelo LTB4 (P<0,05). Além disso, a mineralização dos osteoblastos foi aumentada pelas células endoteliais e diminuída pelas células endoteliais mediadas pelo LTB4 (P<0,05). Assim, podemos concluir que os fatores angiogênicos das células endoteliais, mediadas ou não pelo LTB4, exercem um papel importante na regulação da diferenciação osteogênica e formação óssea contribuindo, portanto, para a compreensão de mecanismos que regulam a patofisiologia de doenças ósseas.
• Imprenta:
  • Publisher place: Bauru
  • Date published: 2019
• Data da defesa: 25.01.2019


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How to cite

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• ABNT

  DOMEZI, João Paulo. Efeito das células endoteliais mediadas pelo LTB4 em células ósseas. 2019. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Bauru, 2019. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-14062019-141242/. Acesso em: 11 out. 2024.

• APA

  Domezi, J. P. (2019). Efeito das células endoteliais mediadas pelo LTB4 em células ósseas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Bauru. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-14062019-141242/

• NLM

  Domezi JP. Efeito das células endoteliais mediadas pelo LTB4 em células ósseas [Internet]. 2019 ;[citado 2024 out. 11 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-14062019-141242/

• Vancouver

  Domezi JP. Efeito das células endoteliais mediadas pelo LTB4 em células ósseas [Internet]. 2019 ;[citado 2024 out. 11 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-14062019-141242/

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