Imunoproteômica aplicada ao aprimoramento do diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana (2019)
- Authors:
- Autor USP: CORRAL, MARCELO ANDREETTA - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MIP
- Subjects: PROTEÔMICA; TESTES IMUNOLÓGICOS; WESTERN BLOTTING; ESTRONGILOIDÍASE; NEMATOIDES; ELISA; ANTÍGENOS
- Keywords: Antígenos de helmintos; Antigens helminth; Ensaio de imunoadsorção enzimática; Enzyme-linked immunosorbent assay; Immunologic tests; Proteomics; Strongyloides stercoralis
- Language: Português
- Abstract: Estrongiloidíase é a infecção parasitária causada pelo nematódeo Strongyloides stercoralis. Em indivíduos imunocompetentes cursa de forma crônica e assintomática na maioria dos casos; entretanto em imunocomprometidos pode assumir as formas graves como a hiperinfecção e/ou estrongiloidíase disseminada. Diante da baixa sensibilidade do diagnóstico parasitológico, vêm sendo realizadas pesquisas envolvendo o imunodiagnóstico, sobretudo voltadas para variações na obtenção das frações antigênicas heterólogas utilizando Strongyloides venezulensis como fonte de antígeno. O presente trabalho teve como objetivo aprimorar o diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana utilizando técnicas imunoproteômicas. Foram utilizadas amostras de fezes e soro de indivíduos imunocompetentes, divididos em três grupos de acordo com o resultado do exame parasitológico (P: positivos para S. stercoralis; OP: com outras parasitoses; N: negativos para quaisquer parasitos ou comensais) e imunocomprometidos divididos em dois grupos de acordo com o resultado do exame parasitológico (S+ID: positivos para S. stercoralis e S-ID: negativos para S. stercoralis ou qualquer parasito). As amostras de soro dos cinco grupos de pacientes foram submetidas a testes sorológicos a partir das frações antigênicas heterólogas de S. venezuelensis solúvel (TS) e de membrana (TM) utilizando as técnicas ELISA, DOT ELISA e Western-blotting. O ELISA apresentou 95% de sensibilidade em ambas frações antigênicas e 91,8% e 93,8% de especificidade para TS e TM, respectivamente. A técnica foi capaz dedetectar anticorpos anti-Strongyloides em 34,4% e 28,1% em pacientes do grupo S+ID utilizando os antígenos TS e TM, respectivamente. O DOT ELISA foi executado somente com a fração TM e apresentou 95% de sensibilidade e 85,7% de especificidade detectando 28,1% de positividade no grupo S+ID. A banda de 40-35 KDa foi a única frequente em todos indivíduos do grupo P e a mais frequente em pacientes S+ID (62,5% para TS e 53,1% para TM). Géis réplicas foram realizados, excisados nas regiões de identificação proteica e submetidos a identificação de proteínas por espectrometria de massas. As proteínas mais abundantes nas frações antigênicas TS e TM foram actina e galectina. A fração TS foi purificada em coluna de afinidade para galectina, dada sua capacidade de modulação do sistema imunológico. As frações não ligada (NL) e galectina (Gal) foram utilizadas como antígenos na técnica ELISA apresentando 90% de sensibilidade e 89,8 e 75% de especificidade para NL e Gal, respectivamente. Foram positivos no ELISA 34,4% e 18,1% das amostras do grupo S+ID utilizando as frações NL e Gal, respectivamente. As técnicas sorológicas utilizando variações antigênicas constituem ferramentas alternativas importantes de diagnósticos que podem ser aplicadas à estrongiloidíase humana, sobretudo na população imunocomprometida
- Imprenta:
- Data da defesa: 18.01.2019
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ABNT
CORRAL, Marcelo Andreetta. Imunoproteômica aplicada ao aprimoramento do diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-16042019-120917/. Acesso em: 13 out. 2024. -
APA
Corral, M. A. (2019). Imunoproteômica aplicada ao aprimoramento do diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-16042019-120917/ -
NLM
Corral MA. Imunoproteômica aplicada ao aprimoramento do diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana [Internet]. 2019 ;[citado 2024 out. 13 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-16042019-120917/ -
Vancouver
Corral MA. Imunoproteômica aplicada ao aprimoramento do diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana [Internet]. 2019 ;[citado 2024 out. 13 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-16042019-120917/
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