Efeito do silenciamento gênico do Tnfa na preservação auditiva em ratos Wistar expostos ao ruído e análise da expressão gênica dessa via metabólica (2018)
- Authors:
- Autor USP: RODRIGUES, JANAINA CANDIDA - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MOF
- Subjects: RUÍDO NA COMUNICAÇÃO; PERDA AUDITIVA PROVOCADA POR RUÍDO; APOPTOSE; NECROSE; AUDIOMETRIA DE RESPOSTA EVOCADA; POTENCIAIS EVOCADOS; RATOS WISTAR
- Keywords: Auditory evoked potential; Evoked response; Fator de necrose tumoral alfa; Noise induced hearing loss; RNA de interferência; RNA interference
- Language: Português
- Abstract: INTRODUÇÃO: A exposição a níveis elevados de pressão sonora é a segunda causa mais comum de perda auditiva sensorioneural adquirida. Está relacionada à morte celular por apoptose, necrose e/ou necrose programada (necroptose) devido ao dano mecânico e/ou metabólico, ocasionando a degeneração de estruturas cocleares como células ciliadas, sobretudo externas, células de suporte e de fibras aferentes do nervo coclear. Estudos têm demostrado um aumento na citocina inflamatória TNFa após a exposição ao ruído, bem como a melhoria auditiva relacionada ao uso de etanercepte, que é um bloqueador destacitocina. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar o efeito do silenciamento gênico do Tnfa na audição de ratos Wistar, expostos ao ruído branco, e identificar o perfil de expressão gênica na via metabólica desse gene. METODOLOGIA: Foram incluídos ratos Wistar do sexo masculino, jovens com limiar auditivo no Peate clique de 50 dBSPL. Os animais foram submetidos à introdução do siRNA Tnfa em uma orelha, e siRNA scramble na orelha contralateral por via trans-timpânica com posterior exposição à 120 dBSPL de ruído branco por 3h. Foi realizado Peate clique e remoção das cócleas para obtenção do cDNA e avaliação da expressão gênica da via metabólica do Tnfa por meio de qRT-PCR. Um grupo de animais, não submetidos ao silenciamento, foi exposto ao ruído para análise dessa via metabólica. Para o cálculo da expressão gênica relativa (Rq) utilizamos o método do deltaCT comparativo e o teste t-Student pareado para avaliar os parâmetrosno Peate clique. RESULTADOS: A taxa de silenciamento observada foi de 74,1%. A média do limiar eletrofisiológico nas orelhas silenciadas foi estaticamente melhor que a orelha scramble (p < 0,001) com valores médios de 49,5 +- 10.5. A amplitude média da onda I em 80 dBSPL e das ondas II e IV em 90 dBSPL foi estatisticamente maior na orelha siRNA Tnfa, sem alteração na latência nas intensidades audíveis,para ambos os lados. A exposição ao ruído promoveu aumento da expressão do gene Tnfa e de seu receptor Tnfrsf1A, 24h após à exposição, associado ao aumento da expressão de genes relacionados à apoptose e diminuição de genes relacionados à sobrevida celular. CONCLUSÃO: O ruído promoveu aumento de expressão do gene Tnfa e de genes envolvidos na apoptose, associado à perda auditiva em modelo experimental. A administração trans-timpânica do siRNA Tnfa promoveu preservação do limiar eletrofisiológico e da amplitude da onda I, II e IV no Peate clique, após exposição ao ruído intenso, sugerindo que a inibição deste pode ser uma estratégia de preservação auditiva promissora. O silenciamento do Tnfa inibiu a disfunção coclear após estímulo acústico, sugerindo que esta proteína é um dos principais agentes envolvidos na perda auditiva induzida pelo ruído, devendo ser considerada como alvo terapêutico na estratégia de preservação auditiva
- Imprenta:
- Data da defesa: 23.05.2018
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ABNT
RODRIGUES, Janaina Candida. Efeito do silenciamento gênico do Tnfa na preservação auditiva em ratos Wistar expostos ao ruído e análise da expressão gênica dessa via metabólica. 2018. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5143/tde-07112018-132314/. Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Rodrigues, J. C. (2018). Efeito do silenciamento gênico do Tnfa na preservação auditiva em ratos Wistar expostos ao ruído e análise da expressão gênica dessa via metabólica (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5143/tde-07112018-132314/ -
NLM
Rodrigues JC. Efeito do silenciamento gênico do Tnfa na preservação auditiva em ratos Wistar expostos ao ruído e análise da expressão gênica dessa via metabólica [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 26 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5143/tde-07112018-132314/ -
Vancouver
Rodrigues JC. Efeito do silenciamento gênico do Tnfa na preservação auditiva em ratos Wistar expostos ao ruído e análise da expressão gênica dessa via metabólica [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 26 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5143/tde-07112018-132314/
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