Caracterização de uma proteína de Leptospira interrogans e avaliação do seu envolvimento na relação patógeno-hospedeiro (2018)
- Authors:
- Autor USP: ROSSINI, AMANDA DIAZ - Interunidades em Biotecnologia
- Unidade: Interunidades em Biotecnologia
- Subjects: LEPTOSPIROSE; BACTÉRIAS PATOGÊNICAS; PROTEÍNAS RECOMBINANTES; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; SEQUENCIAMENTO GENÉTICO; CAMUNDONGOS; RELAÇÕES HOSPEDEIRO-PARASITA
- Keywords: Adesina; Adesine; Leptospira; Leptospira; Leptospirose; Leptospirosis; Pathogenesis; Patogenicidade; Proteína recombinante; Recombinant protein
- Language: Português
- Abstract: As bactérias patogênicas do gênero Leptospira são o agente causador da leptospirose, uma doença de importância global. As leptospiras patogênicas causam infecção em um amplo espectro de animais e no homem. As leptospiras podem invadir o corpo humano através de abrasões na pele e mucosa. A invasividade bacteriana depende de várias etapas, tais como: aderência, invasão e disseminação através dos tecidos do hospedeiro. Recentemente, nosso grupo identificou proteínas de membrana externa que atuam como adesinas de leptospira e/ou receptores de componentes do plasma hospedeiro, o que poderia contribuir para a patogenicidade bacteriana. Assim, o presente projeto tem como objetivo avaliar as propriedades funcionais do gene LIC10920, identificado na sequência genômica de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni, como uma proteína hipotética, predita de membrana externa. A sequência LIC10920 foi amplificada por PCR e clonada no vetor de expressão pAE. O plasmídeo pAE contendo o inserto foi introduzido em estirpes de E. coli para a expressão da proteína. A proteína recombinante rLIC10920 foi purificada por cromatografia de afinidade a níquel e sua integridade estrutural foi avaliada pela técnica de dicroísmo circular. Camundongos foram imunizados com a LIC10920 para a avaliação da sua imunogenicidade. A presença de IgG humano contra LIC10920, foi avaliada por ELISA, em amostras de soro de pacientes com leptospirose. Assim, como a sua ligação com componentes da matriz extracelular eplasma do hospedeiro. Animais imunizados apresentaram alto título de anticorpos contra LIC10920. Além disso, a proteína foi reconhecida por anticorpos presente em amostras de soro humano infectado. A proteína foi capaz de interagir com plasminogênio e laminina de maneira dose-dependente e saturável. Em ambas as interações, a participação das regiões imunogênicas se mostrou importante. rLIC10920 foi capaz de capturar o plasminogênio direto do soro humano também de maneira dose-dependente. Por fim, foi observado que o plasminogênio ligado a rLIC10920 pode ser convertido em plasmina. A proteína em estudo é expressa durante a infecção e podemos atribuir a função de adesina, com papel na patogênese da bactéria
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.03.2018
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ABNT
ROSSINI, Amanda Diaz. Caracterização de uma proteína de Leptospira interrogans e avaliação do seu envolvimento na relação patógeno-hospedeiro. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15062018-101521/. Acesso em: 28 fev. 2026. -
APA
Rossini, A. D. (2018). Caracterização de uma proteína de Leptospira interrogans e avaliação do seu envolvimento na relação patógeno-hospedeiro (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15062018-101521/ -
NLM
Rossini AD. Caracterização de uma proteína de Leptospira interrogans e avaliação do seu envolvimento na relação patógeno-hospedeiro [Internet]. 2018 ;[citado 2026 fev. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15062018-101521/ -
Vancouver
Rossini AD. Caracterização de uma proteína de Leptospira interrogans e avaliação do seu envolvimento na relação patógeno-hospedeiro [Internet]. 2018 ;[citado 2026 fev. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-15062018-101521/
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