Genes de cisteíno proteases (Catepsina L-like) de Leishmania infantum chagasi: caracterização, relações filogenéticas e diagnóstico molecular (2018)
- Autores:
- Autor USP: SILVA, RYAN EMILIANO DA - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VPS
- Assuntos: LEISHMANIOSE VISCERAL; FILOGENIA; CÃES; ZOONOSES
- Palavras-chave do autor: Diagnóstico Molecular; Dogs; Molecular Diagnosis; Phylogeny; Visceral Leishmaniasis; Zoonotic Diseases
- Agências de fomento:
- Idioma: Português
- Resumo: Os parasitas pertencentes ao gênero Leishmania têm distribuição ubíqua. Este táxon inclui Leishmania infantum chagasi, agente etiológico da leishmaniose visceral nas Américas, uma zoonose negligenciada cujas metodologias diagnósticas acumulam uma série de limitações, requerendo a validação e padronização de metodologias diagnósticas satisfatórias. Vários fatores estão relacionados à patogênese causada por este protozoário, entre eles a catepsina L-like, uma cisteíno protease envolvida em processos regulatórios metabólicos e infecciosos. Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia do gene de catepsina L-like isoforma CPA como alvo de diagnóstico molecular e como marcador filogenético que permita a compreensão das variações intraespecíficas e elucidem a história evolutiva de L. infantum chagasi no Brasil. Foram utilizados 44 isolados de L. infantum chagasi de diferentes estados brasileiros. Os fragmentos do gene de catepsina L-like foram amplificados, purificados, sequenciados, alinhados manualmente e analisados por métodos filogenéticos de máxima parcimônia e inferência bayesiana. As sequências geradas foram usadas para pesquisar e sintetizar iniciadores a serem usados em reações específicas para o parasita alvo. O gene de catepsina L-like não mostrou variabilidade intraespecífica entre os isolados analisados, sugerindo um evento recente de introdução do mesmo nas Américas. O par de iniciadores propostos amplificou o DNA alvo de isolados de L. infantumchagasi, sendo efetivo na amplificação de DNA em concentrações de até 10-11g / μl. O marcador proposto não apresentou reações cruzadas com outros hemoparasitas de importância clínica. Quando utilizado para o diagnóstico em um painel de amostras clínicas de cães, obteve-se uma frequência de positividade de 49,03% (102/208), contrastando com o valor de 14,42% (30/208) obtido com o marcador para o gene do espaçador ribossomal interno ITS. Quando testado em amostras de flebotomíneos se obteve um valor de 6,25% e em amostras de pacientes humanos o valor foi de 14,28%. Os marcadores também foram eficazes em amplificar DNA extraído de amostras de urina, de sangue fixado em papel filtro e mesmo em amostras de swab de lesões conjuntivas. Este conjunto de parâmetros permite inferir que o CatLeish- PCR é sensível e específico para o diagnóstico de L. infantum chagasi podendo ser aplicado tanto em pesquisas clínicas quanto em inquéritos epidemiológicos de vigilância
- Imprenta:
- Data da defesa: 21.02.2018
-
ABNT
SILVA, Ryan Emiliano da. Genes de cisteíno proteases (Catepsina L-like) de Leishmania infantum chagasi: caracterização, relações filogenéticas e diagnóstico molecular. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-12072018-145115/. Acesso em: 27 jun. 2024. -
APA
Silva, R. E. da. (2018). Genes de cisteíno proteases (Catepsina L-like) de Leishmania infantum chagasi: caracterização, relações filogenéticas e diagnóstico molecular (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-12072018-145115/ -
NLM
Silva RE da. Genes de cisteíno proteases (Catepsina L-like) de Leishmania infantum chagasi: caracterização, relações filogenéticas e diagnóstico molecular [Internet]. 2018 ;[citado 2024 jun. 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-12072018-145115/ -
Vancouver
Silva RE da. Genes de cisteíno proteases (Catepsina L-like) de Leishmania infantum chagasi: caracterização, relações filogenéticas e diagnóstico molecular [Internet]. 2018 ;[citado 2024 jun. 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-12072018-145115/ - Avaliação da Imunogenicidade de peptídeos derivados de Catepsina L-like de Leishmania infantum em modelo murino
- Exploring Leishmania infantum cathepsin as a new molecular marker for phylogenetic relationships and visceral leishmaniasis diagnosis
- Molecular diagnosis and prevalence of Trypanosoma vivax (Trypanosomatida: Trypanosomatidae) in buffaloes and ectoparasites in the Brazilian Amazon Region
- First molecular-based detection study of Leishmania infantum in the Tapirapé indigenous population in the Brazilian Amazon
Como citar
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
