Desenvolvimento de métodos de proteômica dirigida e sua aplicação na quantificação de painéis proteicos (2017)
- Authors:
- Autor USP: LANFREDI, GUILHERME PAUPERIO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: PROTEÔMICA; ESPECTROMETRIA DE MASSAS
- Keywords: Espectrometria de Massas; Glicólise; Glycolysis; Mass Spectrometry; MRM; Proteômica; Proteomics
- Language: Português
- Abstract: O metabolismo celular é substancialmente alterado durante a oncogênese, progressão tumoral e outros processos patológicos. Tem sido frequentemente analisado para compreensão dos processos que permitem o crescimento dos tecidos, reprodução, manutenção da homeostase e resposta a sinais extracelulares. Dentre os vários métodos para caracterização de alterações metabólicas, a espectrometria de massas tem contribuído significativamente para a identificação e quantificação de proteínas envolvidas no metabolismo, e também para a caracterização do metaboloma. A análise proteômica baseada em espectrometria de massas permite estudos qualitativos em grande escala, adequados para a busca e descoberta de analitos relevantes. A análise proteômica dirigida complementa esse caráter com qualidade quantitativa para proteínas alvo pré-selecionadas. Neste trabalho foram desenvolvidos métodos de proteômica dirigida para o monitoramento de alterações quantitativas nos níveis de proteínas envolvidas na via glicolítica do metabolismo da glicólise. Para tal peptídeos proteotípicos para cada proteína foram identificados e padronizados utilizando a estratégia de monitoramento de reações múltiplas. O painel foi aplicado para obter resultados das alterações que ocorrem em um modelo de progressão tumoral. Com esta estratégia empregada, foi possível selecionar e utilizar vários peptídeos representativos das enzimas da via glicolítica e também de algumas proteínas relevantes ao câncer. A utilização de peptídeos sintéticos facilitou substancialmente o processo de desenvolvimento do método. Por fim, com a metodologia desenvolvida, foi demonstrado para células MCF7, que o fator EGF alterou a expressão das proteínas da via glicolítica, aumento no fluxo para via das pentoses e capacidade aumentada da respiração celular. Este estudo, portanto, sugere uma nova disposição dometabolismo celular dado o conhecimento estabelecido em relação aos efeitos na respiração, como o efeito Warburg
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2017
- Data da defesa: 01.12.2017
-
ABNT
LANFREDI, Guilherme Pauperio. Desenvolvimento de métodos de proteômica dirigida e sua aplicação na quantificação de painéis proteicos. 2017. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2017. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-17042018-143452/. Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Lanfredi, G. P. (2017). Desenvolvimento de métodos de proteômica dirigida e sua aplicação na quantificação de painéis proteicos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-17042018-143452/ -
NLM
Lanfredi GP. Desenvolvimento de métodos de proteômica dirigida e sua aplicação na quantificação de painéis proteicos [Internet]. 2017 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-17042018-143452/ -
Vancouver
Lanfredi GP. Desenvolvimento de métodos de proteômica dirigida e sua aplicação na quantificação de painéis proteicos [Internet]. 2017 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-17042018-143452/ - Análise do secretoma de células de câncer de ovário Caov-3 induzidas ao processo de transição epitélio-mesenquimal por fator de crescimento EGF e sua associação com assinaturas de tumores de alto grau
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