Expressão do gene uidA sob controle de promotores preferencialmente expressos no floema de plantas transgênicas de citrange 'Carrizo' (2017)
- Authors:
- Autor USP: BEZERRA, YANE CAROLINE DOS ANJOS - ESALQ
- Unidade: ESALQ
- Sigla do Departamento: LPV
- Subjects: EXPRESSÃO GÊNICA; FRUTAS CÍTRICAS; LARANJA; PLANTAS TRANSGÊNICAS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE
- Language: Português
- Abstract: O Brasil é o maior produtor de laranja do mundo, liderando também a produção e exportação de suco concentrado congelado. Um dos fatores que ameaçam o setor é o grande número de doenças, principalmente, as bacterianas como o Huanglongbing (HLB). O HLB é considerado uma das mais graves doenças dos citros, que compromete seu desenvolvimento e produção, podendo levar à morte das plantas afetadas. Os agentes associados a esta doença são bactérias endógenas restritas ao floema (Candidatus Liberibacter spp.). No gênero Citrus, ainda não foram encontradas espécies resistentes ao HLB, o que tem estimulado a utilização de ferramentas biotecnológicas, como a transformação genética, para auxiliar os programas de melhoramento genético, nos quais genes de interesse agronômico são introduzidos visando resistência a doenças. Na busca por uma planta transgênica resistente ao HLB, é desejável obter construções gênicas nas quais o gene de interesse se expresse, preferencialmente, na região em que a bactéria coloniza a planta, ou seja, no caso do HLB, no floema. Este trabalho objetivou avaliar plantas transgênicas de citrange 'Carrizo' [Poncirus trifoliata (L.) Raf. x Citrus sinensis (L.) Osbeck] com gene uidA (β-glucuronidase), dirigido pelos promotores dos genes CsPP2.1 (Phloem protein 2) e CsVTE2 (homogentisato fitiltransferase) obtidos de Citrus sinensis. Foram analisadas as especificidades de cada promotor, e estes foram comparados com a ação do promotor constitutivo CaMV35S.Análises moleculares, como Southern blot e qPCR, foram realizadas a fim de verificar o número de cópias do transgene em cada planta avaliada, e quantificar a expressão relativa do gene uidA dirigido pelos diferentes promotores, respectivamente. Análises histológicas foram feitas para verificar a localização da expressão do gene repórter GUS (uidA). A expressão relativa do gene uidA dirigido pelos promotores específicos foi mais baixa quando comparada com o promotor constitutivo CaMV35S, uma vez que estes promotores direcionam a expressão apenas para tecidos específicos. O promotor CsPP2.1 direcionou a expressão do gene uidA para o tecido floemático, mais especificamente junto às células companheiras e elementos de tubo crivado. O promotor CsVTE2 direcionou a expressão do gene repórter preferencialmente para a periferia do parênquima cortical e para as células guarda, o que corresponde às áreas com presença de cloroplastos, além de também direcionar a expressão para o tecido floemático. Apesar de não ser específico de floema, o promotor CsVTE2 constitui-se em uma boa alternativa para construções visando o combate a doenças vasculares por estar envolvido em importantes processos fisiológicos da planta, como o combate a estresses oxidativos e o carregamento de fotoassimilados no floema. Os resultados sugerem que CsPP2.1 e CsVTE2 são promotores potenciais para serem utilizados em construções gênicas visando o controle de doenças vasculares tais como o HLB
- Imprenta:
- Publisher place: Piracicaba
- Date published: 2017
- Data da defesa: 09.08.2017
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ABNT
BEZERRA, Yane Caroline dos Anjos. Expressão do gene uidA sob controle de promotores preferencialmente expressos no floema de plantas transgênicas de citrange 'Carrizo'. 2017. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2017. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-14032018-102205/. Acesso em: 12 jun. 2025. -
APA
Bezerra, Y. C. dos A. (2017). Expressão do gene uidA sob controle de promotores preferencialmente expressos no floema de plantas transgênicas de citrange 'Carrizo' (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-14032018-102205/ -
NLM
Bezerra YC dos A. Expressão do gene uidA sob controle de promotores preferencialmente expressos no floema de plantas transgênicas de citrange 'Carrizo' [Internet]. 2017 ;[citado 2025 jun. 12 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-14032018-102205/ -
Vancouver
Bezerra YC dos A. Expressão do gene uidA sob controle de promotores preferencialmente expressos no floema de plantas transgênicas de citrange 'Carrizo' [Internet]. 2017 ;[citado 2025 jun. 12 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-14032018-102205/
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