Processos de produção da proteína heteróloga mCherry por Chlamydomonas reinhardtii (2017)
- Authors:
- Autor USP: DIAZ ARIAS, CESAR ANDRES - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBT
- Subjects: BIOTECNOLOGIA; MICROALGAS; FOTOSSÍNTESE
- Language: Português
- Abstract: Este trabalho tem como finalidade estudar as melhores condições do cultivo da microalga Chlamydomonas reindhartii geneticamente modificada para a produção da proteína fluorescente mCherry a partir do estudo dos macronutrientes contidos no meio de cultivo. A proteína mCherry possui a vantagem de ser facilmente detectada no meio de cultivo por espectofotometria convencional, convertendo-se, desta forma, em uma molécula interessante para o estudo como modelo de expressão. Inicialmente, foram estudadas três diferentes fontes de nitrogênio para avaliar a expressão da proteína recombinante. Os resultados indicaram que a melhor fonte de nitrogênio para a produção da mCherry foi o NH4NO3. Em seguida, para avaliar os efeitos gerados pelos macronutrientes (acetato, cloreto de cálcio, sultato de magnésio, nitrato de amônio e fostato total) contidos no meio de cultivo TAP, foi realizado um planejamento composto central '2 POT. 5', em cultivos em microplacas, sendo os resultados avaliados por regressão multivariada. Além disso, a análise realizada por regressão multivariada indicou que, dos níveis avaliados das variáveis, as condições que melhor atendem à otimização da produção de mCherry e crescimento celular são: acetato, 33,35 mM; cloreto de cálcio, 0,45 mM; sulfato de magnésio, 0,83 mM; nitrato de amônio, 10,31 mM; fosfato total, 1,96 mM. Essas condições foram escolhidas para cultivo em fotobiorreator tubular, onde foi obtido título de fluorescência de mCherry a 608 nm de 59209 UF, correspondendo a um aumento de 118,5% maior que o título de fluorescência obtido com uso de meio TAP padrão. Com a finalidade de seguir com os processos de produção foi disenhado um biorreator tipo coluna e foi reaizado um estudio de produção em sistema semicontinuo. Os resultados obtidos demostraram que o sistema semicontinuo aumento 2,6 veces a produtividade da biomassa.
- Imprenta:
- Data da defesa: 20.10.2017
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ABNT
DIAZ ARIAS, Cesar Andres. Processos de produção da proteína heteróloga mCherry por Chlamydomonas reinhardtii. 2017. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2017. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-06122017-102518/. Acesso em: 11 out. 2024. -
APA
Diaz Arias, C. A. (2017). Processos de produção da proteína heteróloga mCherry por Chlamydomonas reinhardtii (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-06122017-102518/ -
NLM
Diaz Arias CA. Processos de produção da proteína heteróloga mCherry por Chlamydomonas reinhardtii [Internet]. 2017 ;[citado 2024 out. 11 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-06122017-102518/ -
Vancouver
Diaz Arias CA. Processos de produção da proteína heteróloga mCherry por Chlamydomonas reinhardtii [Internet]. 2017 ;[citado 2024 out. 11 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9134/tde-06122017-102518/
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