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Comunicação exossomal na transdiferenciação de células-tronco em cocultivo com células neuronais (2017)

  • Authors:
  • Autor USP: ROBALLO, KELLY CRISTINE SANTOS - FZEA
  • Unidade: FZEA
  • Sigla do Departamento: ZMV
  • Subjects: SISTEMA NERVOSO; EXPRESSÃO GÊNICA; INTERAÇÃO CELULAR
  • Keywords: Exosome; Exossomo; Transdiferenciação; Transdifferentiation
  • Language: Português
  • Abstract: Células neuronais cocultivadas com células-tronco derivadas do tecido adiposo (ADSC) podem induzir estas últimas à transdiferenciação neuronal. No entanto, os processos de comunicação celular envolvidos nessa indução, e a funcionalidade da ADSC transdiferenciada in vivo, são desconhecidos. Recentemente, um novo tipo de comunicação celular mediada por vesículas extracelulares são indicados na modulação de diferentes eventos celulares como a diferenciação. Portanto, a hipótese, nesta proposta, foi identificar se o processo de diferenciação celular é mediado por vesículas extracelulares e se as células diferenciadas são capazes de atuar na regeneração de tecidos nas lesões do sistema nervoso periférico. Para tal, essa pesquisa foi dividida em duas fases: a primeira consiste no processo in vitro, com o objetivo de observar o processo de transição da ADSC para a linhagem neuronal e analisar a função da comunicação celular no processo de diferenciação; a segunda consistiu na avaliação in vivo da possível funcionalidade das ADSC diferenciadas. O camundongo foi o modelo animal utilizado (C57BL/6 e FVB). As ADSC e as células neuronais foram isoladas, cultivadas em cultivo primário e cocultivadas durante três, sete e 14 dias. Para a comprovação das mudanças fenotípicas das ADSC, realizou-se a imunolocalização com beta tubulina III e SNAP25 e PCR em tempo real (RT-qPCR) dos genes Map2 e Snap25. Seguido de analises de genes relacionados com a neurogênese. Adicionalmente, as vesículasextracelulares foram isoladas e utilizados para análises in vitro da diferenciação e análises gênicas e funcionais. Como resultado, verificou-se que as ADSC em cocultivo com neurônios podem se diferenciar em neuronais-like. Além disso, comprovou-se a comunicação por vesículas extracelulares entre neurônios e ADSC, e as vesículas extracelulares foram correlacionadas neste processo, pelo transporte da proteína SNAP25. Após estes resultados prosseguiu-se para a segunda fase deste trabalho, a etapa in vivo, que incidiu na utilização das ADSC cocultivadas por sete dias e avaliação funcional local e sistêmica no processo de regeneração do nervo ciático após neurotmese. Como resultado desta etapa as células-tronco cocultivadas modularam a lesão, e proporcionaram uma melhoria na funcionalidade após lesão. Conclui-se, através desta pesquisa, que as ADSC diferenciadas em neuronais-like, sob indução dos neurônios e suas vesículas extracelulares podem ser uma fonte celular alternativa no auxílio na regeneração de nervos periféricos
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 22.09.2017
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      ROBALLO, Kelly Cristine Santos; AMBRÓSIO, Carlos Eduardo; SILVEIRA, Juliano Coelho da. Comunicação exossomal na transdiferenciação de células-tronco em cocultivo com células neuronais. 2017.Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2017. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-23112017-104437/ >.
    • APA

      Roballo, K. C. S., Ambrósio, C. E., & Silveira, J. C. da. (2017). Comunicação exossomal na transdiferenciação de células-tronco em cocultivo com células neuronais. Universidade de São Paulo, Pirassununga. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-23112017-104437/
    • NLM

      Roballo KCS, Ambrósio CE, Silveira JC da. Comunicação exossomal na transdiferenciação de células-tronco em cocultivo com células neuronais [Internet]. 2017 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-23112017-104437/
    • Vancouver

      Roballo KCS, Ambrósio CE, Silveira JC da. Comunicação exossomal na transdiferenciação de células-tronco em cocultivo com células neuronais [Internet]. 2017 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-23112017-104437/


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