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Production and Characterization of Pulchellin A chain conjugated to HIV mAbs, and study its selective cytotoxicity against cells expressing HIV envelope (2017)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: SADRAEIAN, MOHAMMAD - IFSC
  • Unidades: IFSC
  • Subjects: ANTICORPOS MONOCLONAIS; HIV; MICROSCOPIA CONFOCAL; CITOMETRIA DE FLUXO; TOXINAS
  • Keywords: Anticorpo monoclonal do HIV; Citometria de fluxo; Confocal microscopy; Cytotoxicity assay; Ensaio de citotoxicidade; Flow cytometry; HIV monoclonal Antibody; Microscopia confocal; Pulchellin
  • Language: Inglês
  • Abstract: As toxinas imunológicas (TIs), que consistem em anticorpos conjugados com toxinas, foram propostas como tratamento para câncer e infecções crônicas. Para desenvolver e melhorar as TI, diferentes toxinas, como a ricina, foram usadas, visando uma maior eficácia contra células alvo. A toxina pulchellina, isolada da planta de Abrus Pulchellus, tem estrutura e função semelhantes à da ricina. Aqui, comparamos duas toxinas de plantas, cadeias A recombinantes de toxinas de ricina (RAC) e pulchellina (PAC), por sua capacidade de matar células que expressam HIV. Resumidamente, RAC e PAC foram produzidos em E. coli e purificados por cromatografia, depois conjugados quimicamente com dois anticorpos monoclonais anti corpo-HIV diferentes (MAcs), MAc 924 anti-gp120 ou MAc 7B2 anti-gp41. Estes conjugados foram caracterizados bioquimicamente por eletroforese microcapilar e teste BCA e imunologicamente por uma variedade de testes ELISA. Realizamos uma comparação lado-a-lado de sua capacidade de ligar, entrar e matar células infectadas pelo HIV (H9 / NL4-3) ou células 293T transfectadas com Env, bem como a sua toxicidade não específica em parentes não infectados ou não transfectados Células. A ligação celular e a internalização foram estudadas por citometria de fluxo e microscopia confocal. Os resultados mostraram que PAC pode funcionar dentro de uma TI efetiva. As TI demonstraram ligação específica contra antígenos nativos em células persistentemente infectadas pelo HIV e antígenosrecombinantes em células transfectadas com Env. Um anticorpo irrelevante conjugado com RAC ou PAC não teve efeito. A citotoxicidade de PAC aparece um pouco menor que o RAC, o padrão de comparação. Este é o primeiro relatório que o PAC pode ter utilidade para o projeto e a construção de TI terapêuticas, destacando o papel potencial para o direcionamento celular específico, não apenas para a AIDS, também para a terapia do câncer
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 29.08.2017
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    • ABNT

      SADRAEIAN, Mohammad; GUIMARÃES, Francisco Eduardo Gontijo. Production and Characterization of Pulchellin A chain conjugated to HIV mAbs, and study its selective cytotoxicity against cells expressing HIV envelope. 2017.Universidade de São Paulo, São Carlos, 2017. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-29092017-150324/ >.
    • APA

      Sadraeian, M., & Guimarães, F. E. G. (2017). Production and Characterization of Pulchellin A chain conjugated to HIV mAbs, and study its selective cytotoxicity against cells expressing HIV envelope. Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-29092017-150324/
    • NLM

      Sadraeian M, Guimarães FEG. Production and Characterization of Pulchellin A chain conjugated to HIV mAbs, and study its selective cytotoxicity against cells expressing HIV envelope [Internet]. 2017 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-29092017-150324/
    • Vancouver

      Sadraeian M, Guimarães FEG. Production and Characterization of Pulchellin A chain conjugated to HIV mAbs, and study its selective cytotoxicity against cells expressing HIV envelope [Internet]. 2017 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-29092017-150324/

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