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Aplicação da cromatografia a gás associada à espectrometria de massas em tandem no diagnóstico da deficiência de 3β-hidroxidesidrogenase (2017)

  • Authors:
  • Autor USP: PRESUTTI, THAIS RODRIGUES - FCF
  • Unidade: FCF
  • Sigla do Departamento: FBC
  • Subjects: CROMATOGRAFIA A GÁS; ESPECTROMETRIA DE MASSAS; ESTEROIDES
  • Language: Português
  • Abstract: Pregnenolona (PREG) e 17-alfa-hidroxipregnenolona (17OHPREG) são dois esteroides produzidos pela glândula adrenal e precursores de vários hormônios esteroidais. A dosagem desses compostos tem aplicações clínicas, como o diagnóstico de doenças relacionadas aos corticoesteroides e mineralocorticóides e especialmente na avaliação da atividade da enzima 3-β-hidroxidesidrogenase que é decisiva no diagnóstico de um dos tipos de hiperplasia da glândula adrenal que causa defeitos severos na síntese de esteroides. Métodos cromatográficos associados à espectrometria de massas superaram a especificidade reduzida dos imunoensaios e tem sido crescentemente utilizados na quantificação de esteroides. Os últimos anos tem sido marcados pela hegemonia da cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) em grande parte devido à velocidade e possibilidade da análise direta de vários analitos. Porém, no caso específico dos esteroides de tipo 3-hidroxi-5-eno, que apresentam baixa afinidade protônica e, portanto, baixa eficiência de ionização, são necessárias muitas etapas para a conversão em derivados mais detectáveis. Embora desfavorecida em relação ao LC-MS/MS nos últimos anos, a cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-MS) apresenta várias características favoráveis para a análise de esteroides como a eficiência cromatográfica ainda insuperável. Adicionalmente, a incorporação da espectrometria de massas em tandem ao CG (CG-MS/MS) torna a técnica tão seletiva quanto LC-MS/MS. No presente trabalho, foi desenvolvido um novo método que permite a extração e derivatização simultâneas da PREG e 17OHPREG de amostras de soro tornando o método de preparo da amostra tão simples quanto os descritos para LC-MS/MS. O método de detecção desenvolvido baseado em ionização química no modo negativo obteve a sensibilidade necessária parao diagnóstico da deficiência da enzima 3-beta-hidroxidesidrogenase utilizando apenas 250 µ:L de amostra
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 10.04.2017
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      PRESUTTI, ^Thais^Rodrigues; CARVALHO, Valdemir Melechco. Aplicação da cromatografia a gás associada à espectrometria de massas em tandem no diagnóstico da deficiência de 3β-hidroxidesidrogenase. 2017.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2017. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-10052017-152745/ >.
    • APA

      Presutti, ^T. ^R., & Carvalho, V. M. (2017). Aplicação da cromatografia a gás associada à espectrometria de massas em tandem no diagnóstico da deficiência de 3β-hidroxidesidrogenase. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-10052017-152745/
    • NLM

      Presutti ^T^R, Carvalho VM. Aplicação da cromatografia a gás associada à espectrometria de massas em tandem no diagnóstico da deficiência de 3β-hidroxidesidrogenase [Internet]. 2017 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-10052017-152745/
    • Vancouver

      Presutti ^T^R, Carvalho VM. Aplicação da cromatografia a gás associada à espectrometria de massas em tandem no diagnóstico da deficiência de 3β-hidroxidesidrogenase [Internet]. 2017 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-10052017-152745/

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