Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada (2015)
- Authors:
- USP affiliated authors: CALVO, ADRIANA MARIA - FOB ; SANTOS, CARLOS FERREIRA DOS - FOB
- Unidade: FOB
- Subjects: GENÓTIPOS; CITOCROMO P-450; DNA; SALIVA; TÉCNICAS DE GENOTIPAGEM
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: A coleta de saliva para a obtenção do DNA genômico de voluntários é uma boa estratégia para se assegurar a adesão, pois é um método não invasivo. Na saliva há células descamadas da cavidade bucal, as quais possuem material genético por conta da presença de DNA. O citocromo P450, possui papel fundamental na metabolização de anti-inflamatórios não esteroidais (AINES) e variações genéticas podem aumentar a incidência de efeitos colaterais. Os resultados obtidos na genotipagem desses voluntários fornecerão a base para um estudo mais abrangente de farmacogenética, área que estuda a associação dos fatores genéticos em relação às repostas individuais aos fármacos (processo FAPESP 2015/10198-8). Métodos: Para a extração de DNA a partir da saliva foi utilizado o QIAamp DNA Mini Kit. Os tubos contendo DNA ficaram armazenados a -20oC até o momento do uso. Para a discriminação dos diferentes genótipos dos genes em estudo, foi utilizado o sistema Taqman® no aparelho de PCR (reação em cadeia da polimerase) em tempo real Viia7. Para discriminação dos haplótipos do CYP2C9 (CYP2C9*2 – rs1799853 e CYP2C9*3 – rs1057910) e CYP2C8 (CYP2C8*3 rs11572080 e rs10509681) foram utilizados ensaios produzidos e validados pela empresa AppliedBiosystems®. Após a confecção dos ensaios em placa de 384 poços, esta foi colocada no aparelho Viia7 e as seguintes condições de ciclagem foram utilizadas para a realização da PCR: temperatura inicial de 95ºC por 10 minutos para a ativação da Taq polimerase, e em seguida 45 ciclos de 95ºC por 15 segundos e 60ºC por 1 minuto. Resultados: (tabela) Na amostra obtida dentre os 10 voluntários, dois apresentaram-se heterozigotos, sendo um CYP2C9 *1/*2 e outro CYP2C9 *1/*3, os outros 8 são homozigotos ancestrais para o CYP2C9 *1/*1. Para o CYP2C8 *3, todos os voluntários são homozigotos ancestrais.Conclusões: O DNA genômico extraído da saliva mostrou-se eficiente para a genotipagem do citocromo P450. E os resultados obtidos servirão de base para as análises farmacogenéticas desses indivíduos em relação ao AINE piroxicam.
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2015
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP
-
ABNT
SANTOS, Gabriel M. e CALVO, Adriana Maria e SANTOS, Carlos Ferreira dos. Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada. 2015, Anais.. São Paulo: Universidade de São Paulo, 2015. . Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Santos, G. M., Calvo, A. M., & Santos, C. F. dos. (2015). Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada. In Resumos. São Paulo: Universidade de São Paulo. -
NLM
Santos GM, Calvo AM, Santos CF dos. Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada. Resumos. 2015 ;[citado 2025 dez. 28 ] -
Vancouver
Santos GM, Calvo AM, Santos CF dos. Genotipagem do citocromo P450 por meio da análise de DNA extraído de saliva não estimulada. Resumos. 2015 ;[citado 2025 dez. 28 ] - Padronização da fase móvel nos ensaios de HPLC para a farmacocinética do Piroxicam
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