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Tese

Criação de uma enzima multifuncional feruloil esterase/acetil-xilano esterase por desenho racional (2016)

  • Authors:
  • Autor USP: ALVES, LUANA DE FÁTIMA - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBI
  • Subjects: BIOQUÍMICA; ENZIMAS; CANA-DE-AÇÚCAR
  • Keywords: Acetil-xilano esterase; Arabinoxilano; Feruloil esterase; Lignocelulose; Acetyl-xylan esterase; Arabinoxylan; Feruloyl esterase; Lignocelluloses; Sugarcane
  • Language: Português
  • Abstract: A parede celular das plantas inclui componentes polissacarídeos complexos, e a sacarificação destes polímeros necessita da ação de conjuntos de enzimas que atuem em sinergia. Enzimas podem formar complexos multi-enzimáticos que possuem mais de uma atividade catalítica derivada de domínios distintos de uma mesma cadeia polipeptídica. O objetivo deste trabalho foi construir uma enzima bifuncional com os domínios catalíticos: acetilxilano esterase (Axe) e feruloil esterase (Fae) para desconstrução de material lignocelulósico de cana-de-açúcar. Para isso, dois diferentes domínios catalíticos: acetilxilano esterase (Axe) e feruloil esterase (Fae) oriundos de Clostridium thermocellum foram fundidas para criar a quimera feruloil esterase/acetil-xilano esterase (FaeAxe). O desenho racional da quimera foi feito utilizando-se de métodos computacionais, que permitiram a criação de um modelo estrutural da enzima. A construção da quimera foi feita por overlap PCR, clonada em vetor pET-SUMO e expressa em Escherichia coli. As duas enzimas parentais (Fae e Axe) foram clonadas em vetor pET28 e expressas em E. coli. Durante a etapa de expressão, observou-se que todas as enzimas foram expressas na forma solúvel. As enzimas feruloil esterase e acetilxilano esterase têm como substrato o polímero arabinoxilano, cuja degradação é uma etapa chave na sacarificação de biomassa. Dessa forma, as atividades da quimera, bem como das enzimas parentais foram testadas contra polímeros arabinoxilano de trigo e arabinoxilano de cana-de-açúcar após a hidrólise pela endoxilanase GH11 de Bacillus Subtilis e analisadas por meio de espectrometria de massas. A atividade desacetilase da enzima parental acetil-xilano esterase e da quimera FaeAxe foram confirmadas, evidenciando que a quimera preservou essa atividade catalítica. A atividade da enzima feruloil esterase e da quimera FaeAxe na remoção de ácido ferúlico dos oligossacarídeos gerados pelaendoxilanase GH11 não foi observada
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 26.02.2016
    • Acesso à fonte
    How to cite
    A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

    • ABNT

      ALVES, Luana de Fátima. Criação de uma enzima multifuncional feruloil esterase/acetil-xilano esterase por desenho racional. 2016. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2016. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-21072016-153003/. Acesso em: 28 dez. 2025.

    • APA

      Alves, L. de F. (2016). Criação de uma enzima multifuncional feruloil esterase/acetil-xilano esterase por desenho racional (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-21072016-153003/

    • NLM

      Alves L de F. Criação de uma enzima multifuncional feruloil esterase/acetil-xilano esterase por desenho racional [Internet]. 2016 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-21072016-153003/

    • Vancouver

      Alves L de F. Criação de uma enzima multifuncional feruloil esterase/acetil-xilano esterase por desenho racional [Internet]. 2016 ;[citado 2025 dez. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-21072016-153003/

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