Produção e caracterização de biomateriais acelulares bioativos obtidos a partir da decelularização de placentas (2016)
- Authors:
- Autor USP: LEONEL, LUCIANO CéSAR PEREIRA CAMPOS - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VCI
- Subjects: BIOLOGIA CELULAR; BIOMATERIAIS; PLACENTA
- Keywords: Biomaterial; Biomaterial; Decellularization; Decelularização; Engenharia de tecidos; Placenta; Tissue engineering
- Language: Português
- Abstract: A bioengenharia de tecidos baseia-se no uso de moléculas bioativas, células-tronco e biomateriais para reparação de tecidos e/ou órgãos. Biomateriais podem ser classificados de acordo com sua origem em sintéticos ou biológicos. Biomateriais biológicos podem ser produzidos por decelularização, que visa a remoção de células da matriz extracelular (MEC), a qual deve manter sua integridade química e física. Placentas são órgãos de grande interesse na bioengenharia de tecidos visto que são descartadas após o parto e possuem grande volume de matriz extracelular. Métodos de decelularização podem ser classificados em químicos, físicos e enzimáticos. Todos conhecidamente causam alterações na MEC, sendo que a associação deles é comumente utilizada. Este trabalho comparou diferentes protocolos e estabeleceu um método mais favorável para a decelularização de placentas caninas, visando a produção de um biomaterial para futuras aplicações clínicas. Inicialmente ambas as porções - materna e fetal - das placentas foram submetidas à 10 protocolos, que avaliaram variáveis como concentração e tempo de incubação em detergentes, diferentes gradientes de temperatura e a influência da perfusão versus imersão das soluções, na MEC remanescente. Com base na transparência do tecido e na ausência de núcleo celular em cortes histológicos, dois protocolos foram selecionados (I e II). Além dos critérios já mencionados, ambos os protocolos foram comparados quanto à quantidade de DNA remanescente na MECdecelularizada e à permanência e distribuição de algumas das proteínas da matriz. O detergente SDS foi o mais eficaz na remoção de células, embora não tenha sido suficiente para promover uma decelularização tecidual completa. O congelamento prévio das placentas requereu um maior tempo de incubação posterior das amostras nos distintos detergentes. Ambos métodos de perfusão e imersão foram eficazes na remoção das células, embora grande concentração de proteínas do citoesqueleto tenham permanecido retidas na matriz. As amostras processadas pelo protocolo I (SDS 1%, 5mM EDTA + 50mM TRIS + 0,5% antibiótico, e Triton X-100 1%) apresentaram maior preservação da organização estrutural da MEC quando comparadas àquelas processadas de acordo com o protocolo II (que diferiu do anterior pela utilização de solução contendo 0,05% tripsina ao invés de 50mM TRIS), esse último método entretanto foi o que melhor removeu as células das placentas, conforme observado em lâminas histológicas e demonstrado pela menor concentração de DNA. Tanto as porções materna quanto fetal submetidas à ambos protocolos, mantiveram as proteínas laminina, fibronectina e colágeno tipo I. O colágeno tipo III foi observado somente na porção fetal. Conclui-se que o protocolo II foi o mais eficaz no processo de decelularização de placentas caninas tendo promovido a remoção do conteúdo celular e diminuição da concentração de DNA na MEC remanescente. No entanto é necessário otimizar o tempo de incubação dasplacentas em soluções enzimáticas visando maior conservação do arranjo da matriz decelularizada. A análise da capacidade da MEC decelularizada por tal método para ser utilizada em bioengenharia de tecidos ainda deve ser avaliada in vitro e in vivo
- Imprenta:
- Data da defesa: 11.02.2016
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ABNT
LEONEL, Luciano César Pereira Campos. Produção e caracterização de biomateriais acelulares bioativos obtidos a partir da decelularização de placentas. 2016. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2016. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-10052016-105533/. Acesso em: 21 fev. 2026. -
APA
Leonel, L. C. P. C. (2016). Produção e caracterização de biomateriais acelulares bioativos obtidos a partir da decelularização de placentas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-10052016-105533/ -
NLM
Leonel LCPC. Produção e caracterização de biomateriais acelulares bioativos obtidos a partir da decelularização de placentas [Internet]. 2016 ;[citado 2026 fev. 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-10052016-105533/ -
Vancouver
Leonel LCPC. Produção e caracterização de biomateriais acelulares bioativos obtidos a partir da decelularização de placentas [Internet]. 2016 ;[citado 2026 fev. 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-10052016-105533/
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