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Perfil de expressão de genes da via Wnt/beta-catenina em timócitos e linfócitos T CD4+ de camundongos BALB/c (2015)

  • Authors:
  • Autor USP: ALI, TACCYANNA MIKULSKI - FM
  • Unidade: FM
  • Sigla do Departamento: MCM
  • Subjects: PROTEÍNAS DE TRANSPORTE; EXPRESSÃO GÊNICA; LINFÓCITOS; LINFÓCITOS T; NEUROIMUNOMODULAÇÃO; CAMUNDONGOS
  • Keywords: Células T CD4+ naive; HIG2; Naive CD4+ T cells; Thymocytes; Timócitos; Via Wnt/beta-catenina; Wnt/beta-catenin pathway
  • Language: Português
  • Abstract: INTRODUÇÃO: A molécula HIG2 pode atuar como agonista da via Wnt/beta-catenina, pois se liga ao receptor Frizzled 10 e induz a expressão de genes da mesma. Dados recentes do nosso grupo mostraram expressão diferencial do gene HIG2 em células mononucleares do sangue periférico e em especial linfócitos T CD4+ naïve, mas não em células diferenciadas de memória em indivíduos sadios. Também observamos in vitro em linfócitos T CD4+ de indivíduos saudáveis que o peptídeo sintético HIG2 induziu a ativação da via Wnt/beta-catenina, produção de HIG2 e outros produtos da via, além da proliferação de células T CD4+ naïve sugerindo um papel do HIG2 na proliferação homeostática de linfócitos T CD4+. HIPÓTESE: Como as células T CD4+ naïve são diretamente exportadas pelo timo, os níveis aumentados de HIG2 neste tipo celular sejam decorrentes da ativação da via Wnt/beta-catenina nos estágios tardios da diferenciação de timócitos. Portanto, as células T CD4+ naïve e timócitos simples positivos para CD4 (SP CD4) apresentariam perfil semelhante de expressão de HIG2 e genes da via Wnt/beta-catenina, incluindo receptores, fatores de transcrição, genes estruturais da via e alvos quando comparadas as demais populações celulares. OBJETIVO: Avaliar a expressão de HIG2 e outros genes da via Wnt/beta-catenina em timócitos e linfócitos T CD4+ naïve e memória de camundongos. MÉTODOS: Isolamos timócitos duplo negativos (DN), timócitos duplo positivos (DP), simples positivos para CD4 e CD8 (SP CD4 e SP CD8) de timo e também células T CD4+ naïve e memória dobaço dos mesmos camundongos pelo procedimento de citometria de fluxo. Analisamos a expressão de vários genes da via Wnt/beta-catenina por PCR em tempo real. RESULTADOS: Em timócitos DN há expressão significativa dos genes que codificam para Frizzled 6, LRP5, TCF-1 e TCF-4 em relação as outras populações celulares. Nos timócitos DP há maior expressão dos genes que codificam para LRP5, LRP6, beta-catenina, GSK-3beta, TCF-1 e Bcl-XL em relação às demais populações. Em timócitos SP CD4 foi detectada expressão diferencial de genes que codificam para Frizzled 10, LRP6, beta-catenina, LEF-1 e HIG2 enquanto que na população de timócitos SP CD8 não observamos expressão significativa de nenhum gene da via Wnt/beta-catenina. Nas células T CD4+ naïve há expressão significativa de Frizzled 5 e Frizzled 10 quando comparadas a timócitos SP CD8 e células T CD4+ de memória . Já nos linfócitos T CD4+ de memória, detectamos maior expressão de Frizzled 6, TCF-4, Bcl-XL e ciclina D1 em relação as demais populações. CONCLUSÃO: Cada população apresenta um perfil distinto de expressão gênica. As maiores semelhanças ocorrem entre os timócitos DN e DP onde as principais diferenças são a expressão de Frizzled 6 e Ciclina D1.Os timócitos SP CD4 e as células T CD4+ naïve não apresentaram níveis semelhantes de expressão gênica de elementos da via Wnt canônica, o que não corrobora a hipótese de que o perfil transcripcional de timócitos SP CD4 e linfócitos T CD4+ naïve é semelhante. Ainda, não observamos expressão aumentadade HIG2 em linfócitos T CD4+ naïve comparados aos de memória, o que contrasta com os resultados obtidos anteriormente por nosso grupo com amostras humanas sugerindo que camundongos não regulam a expressão de HIG2 em linfócitos T CD4+ como os seres humanos
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 27.08.2015
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      ALI, Taccyanna Mikulski; CUNHA NETO, Edecio. Perfil de expressão de genes da via Wnt/beta-catenina em timócitos e linfócitos T CD4+ de camundongos BALB/c. 2015.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2015. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5146/tde-06112015-144437/ >.
    • APA

      Ali, T. M., & Cunha Neto, E. (2015). Perfil de expressão de genes da via Wnt/beta-catenina em timócitos e linfócitos T CD4+ de camundongos BALB/c. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5146/tde-06112015-144437/
    • NLM

      Ali TM, Cunha Neto E. Perfil de expressão de genes da via Wnt/beta-catenina em timócitos e linfócitos T CD4+ de camundongos BALB/c [Internet]. 2015 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5146/tde-06112015-144437/
    • Vancouver

      Ali TM, Cunha Neto E. Perfil de expressão de genes da via Wnt/beta-catenina em timócitos e linfócitos T CD4+ de camundongos BALB/c [Internet]. 2015 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5146/tde-06112015-144437/

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