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Expressão gênica de proteínas de choque térmico como marcador molecular de termotolerância em vacas Nelore (2015)

  • Authors:
  • Autor USP: HOOPER, HENRIQUE BARBOSA - FZEA
  • Unidade: FZEA
  • Sigla do Departamento: ZAB
  • Subjects: GADO NELORE; EXPRESSÃO GÊNICA; LEUCÓCITOS
  • Keywords: Bos taurus indicus; Gerenciamento de calor; Heat management; HSP; Leucócitos; Leukocytes; Termólise; Thermolysis
  • Language: Português
  • Abstract: Objetivou-se com este estudo compreender as dinâmicas das temperaturas corporais em fêmeas da raça Nelore, e relacionar os aspectos fisiológicos da termorregulação com as respostas celulares pela expressão de proteínas de choque térmico. O projeto foi desenvolvido no Laboratório de Biometeorologia e Etologia, da Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da Universidade de São Paulo, Pirassununga-SP. Foram utilizadas 20 vacas Nelore pluríparas, cíclicas, mantidas em sistema de pastejo. O período experimental precedeu a estação de monta de 2013 e terminou na inseminação artificial. Para classificar os animais quanto ao gerenciamento de calor foi monitorada a temperatura vaginal durante seis dias por meio de 16 data loggers (n=16). Com o intuito de melhor compreender o gerenciamento de calor, outras respostas fisiológicas, nomeadamente temperatura retal, caudal, ocular, frequência respiratória e taxa de sudação foram colhidas durante os quatro dias finais do monitoramento da temperatura vaginal. Para expressão gênica relativa colheram-se amostras de sangue (n=20). Foram realizados choques térmicos in vitro a 38ºC, 40ºC e 42ºC por duas horas. Após tratamento térmico obteve-se o pellet de leucócitos para posterior extração do RNA pelo método TRIzol. Foram escolhidas 10 vacas com os melhores resultados de concentração de RNA, 5 pertencentes ao grupo de vacas eficientes quanto ao gerenciamento de calor, e 5 não eficientes (n=10). A RT-PCR foi realizada com o kit SuperScriptIII. A reação polimerase em cadeia em tempo real (qPCR) ocorreu no aparelho StepOnePlus® Applied Biosystem utilizando como marcador fluorescente o SYBR® Green para os genes alvo validados HSPA1A, HSPD1, HSP90AA1, HIF1A e endógenos ACTB, RPL15 e PPIA. Os dados foram analisados por ANOVA, regressão e correlação do SAS 9.2. As vacas foram classificadas em eficientes e não eficientes por meio de coeficientes angulares, advindos da regressão das temperaturas vaginais durante períodos de ganho e perda de calor. As vacas eficientes apresentaram menores temperaturas retais 37,65ºC (P<0,01) e maior taxa de sudação 528,73 g. m-². h-¹ (P<0,06). A nível celular, o aumento programado in vitro da temperatura não aumentou quantidade de transcritos, promovendo manutenção à 38ºC e 40ºC e declínio à 42ºC. A ordem decrescente da abundância de transcritos foi HSPA1A, HSPD1 e HSP90AA1. Pode-se concluir que vacas Nelore com diferentes gerenciamentos de calor apresentam respostas termorregulatórias diferentes. A HSPA1A apresentou a maior abundância de transcritos sendo considerada como marcador molecular para termotolerância, por ser a mais sensível à temperatura e bem conservada. Não foi observado diferença nas expressões gênicas relativas das proteínas de choque térmico entre os animais classificados quanto ao gerenciamento de calor
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 08.07.2015
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      HOOPER, Henrique Barbosa; TITTO, Evaldo Antônio Lencioni. Expressão gênica de proteínas de choque térmico como marcador molecular de termotolerância em vacas Nelore. 2015.Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2015. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-08092015-112214/ >.
    • APA

      Hooper, H. B., & Titto, E. A. L. (2015). Expressão gênica de proteínas de choque térmico como marcador molecular de termotolerância em vacas Nelore. Universidade de São Paulo, Pirassununga. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-08092015-112214/
    • NLM

      Hooper HB, Titto EAL. Expressão gênica de proteínas de choque térmico como marcador molecular de termotolerância em vacas Nelore [Internet]. 2015 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-08092015-112214/
    • Vancouver

      Hooper HB, Titto EAL. Expressão gênica de proteínas de choque térmico como marcador molecular de termotolerância em vacas Nelore [Internet]. 2015 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-08092015-112214/


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