A via de sinalização do AMPc/PKA participa dos efeitos inibitórios do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) nos sistemas proteolíticos da musculatura esquelética de roedores (2015)
- Authors:
- Autor USP: MACHADO, JULIANO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RFI
- Subjects: MÚSCULO ESQUELÉTICO; METABOLISMO DE PROTEÍNA; ATROFIA MUSCULAR
- Language: Português
- Abstract: O Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) é um neuropeptídeo co-secretado com a acetilcolina (ACh) pelo neurônio motor na placa motora terminal da musculatura esquelética, com funções bem descritas sobre os mecanismos de excitação-contração, por meio da ativação da sinalização do AMPc/PKA. No entanto, seu papel fisiológico no metabolismo protéico muscular é completamente desconhecido. Considerando que o AMPc é um importante mediador da inibição da proteólise muscular, a hipótese a ser testada neste trabalho é que o CGRP, exerce efeitos anti-catabólicos na musculatura esquelética de roedores. Para isso, foram utilizados métodos bioquímicos e de biologia molecular para a análise da degradação de proteínas, expressão gênica e quantificação do nível de fosforilação e conteúdo total de proteínas envolvidas com o processo de síntese e degradação proteica. O presente estudo mostra que: 1) O CGRP estimula a sinalização do AMPc/PKA/CREB in vitro em músculos EDL (glicolíticos) e soleus (oxidativos) de ratos normais e desnervados (DEN); 2) O CGRP, em diferentes concentrações in vitro, reduz a proteólise total em ambos os músculos sem alterar a síntese proteica; 3) O músculo EDL é mais responsivo ao efeito anti-proteolítico do CGRP quando comparado ao soleus; 4) O sistema proteolítico autofágico-lisossomal é responsável pelos efeitos anti-proteolíticos induzidos pelo CGRP em músculos EDL de ratos normais e DEN. Estes efeitos estão associados à maior fosforilação da Akt (ativação) e de Foxo1 (inativação) e menor expressão de genes e proteínas do sistema proteolítico autofágico-lisossomal; 5) O H89 (inibidor da PKA), abole completamente o efeito inibitório do CGRP na fosforilação de FoxO1 e também na lipidação da LC3 (marcador de autofagia), indicando que a PKA é a proteína quinase responsável pelos efeitos inibitórios do CGRP na transcriçãode genes do sistema autofágico-lisossomal induzidos por FoxO1, assim como no controle pós-traducional de autofagia; 6) O tratamento sistêmico agudo in vivo com CGRP eleva os níveis de fosforilação de CREB-(Ser133), Akt-(Ser473) e FoxO1-(Ser256), assim como reduz a lipidação da LC3 em EDL de ratos DEN, fortalecendo os achados do papel inibitório do CGRP no sistema autofágico-lisossomal; 7) O sistema Ca2+-dependente é responsável pelos efeitos anti-proteolíticos induzidos pelo CGRP em músculos soleus de ratos normais e DEN. Estes efeitos estão associados com reduzida expressão de genes e conteúdo proteico das calpaínas; 8) O CGRP in vivo estimula a sinalização de PKA/CREB e reduz o conteúdo proteico da forma ativa da calpaína 1 em músculos soleus de ratos DEN, fortalecendo o papel inibitório do CGRP no sistema proteolítico dependente de Ca2+. 9) Em músculos glicolíticos (Tibialis anterior e gastrocnemius) de camundongos, o CGRP ativa a sinalização do AMPc/PKA, reduz o conteúdo proteico assim como os níveis de RNAm basal e induzido pela DEN dos componentes dos sistemas autofágico-lisossomal e dependente de Ca2+; 10) Estes efeitos, estão associados com um menor número de vesículas endocíticas de receptores de ACh e preservação da sinapse tanto em situação basal como atrófica. Em conjunto, estes resultados demonstram, pela primeira vez, que o CGRP, por meio da ativação da via de sinalização do AMPc, exerce efeito supressor dos sistemas proteolíticos autofágico-lisossomal e Ca2+-dependente em músculos esqueléticos de roedores, tanto em situações basais como após a perda da inervação motora
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2015
- Data da defesa: 25.02.2015
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ABNT
MACHADO, Juliano. A via de sinalização do AMPc/PKA participa dos efeitos inibitórios do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) nos sistemas proteolíticos da musculatura esquelética de roedores. 2015. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2015. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Machado, J. (2015). A via de sinalização do AMPc/PKA participa dos efeitos inibitórios do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) nos sistemas proteolíticos da musculatura esquelética de roedores (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Machado J. A via de sinalização do AMPc/PKA participa dos efeitos inibitórios do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) nos sistemas proteolíticos da musculatura esquelética de roedores. 2015 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Machado J. A via de sinalização do AMPc/PKA participa dos efeitos inibitórios do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) nos sistemas proteolíticos da musculatura esquelética de roedores. 2015 ;[citado 2024 abr. 23 ]
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