Análise do transcriptoma do desenvolvimento embrionário de Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) e a regulação dos genes eve, hairy, ftz-f1 e act5C pelo miR-34 (2014)
- Authors:
- Autor USP: FREITAS, FLÁVIA CRISTINA DE PAULA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RGE
- Subjects: ABELHAS; EMBRIÃO (DESENVOLVIMENTO); REGULAÇÃO GÊNICA
- Language: Português
- Abstract: Desde a publicação do genoma de Apis mellifera em 2006, as abelhas ganharam destaque nos estudos de genética do desenvolvimento. A disponibilidade das sequências genômicas facilitou o emprego de diversas técnicas de biologia molecular para o estudo da espécie, associadas a análises e predições computacionais. A complexidade da cascata molecular do desenvolvimento embrionário é pouco compreendida em A. mellifera e o conhecimento sobre a participação dos microRNAs (miRNAs) nesta fase está restrito ao silenciamento de Dicer em embriões que alterou a padronização dos tecidos embrionários. Outros trabalhos que investigaram o papel dos miRNAs em abelhas, não tiveram a embriogênese como foco. Assim, decidimos investigar a regulação de mRNAs por miRNAs na ontogênese de A. mellifera, um assunto ainda pouco explorado para a espécie. Para investigar a embriogênese das abelhas, sequenciamos e analisamos o transcriptoma (mRNA e miRNAs) de quatro fases do desenvolvimento embrionário: Blastoderme, Gastrulação, Banda Germinativa e Corpo Larval. Na busca pelo papel regulador dos miRNAs nesta fase do desenvolvimento, usamos um preditor de sítios de ligação para miRNAs para identificar interações na 3'UTR dos mRNA de A. mellifera e de D. melanogaster. Das interações miRNA-alvo conservadas em ambas as espécies, selecionamos aquelas que envolviam o miRNA-34 (miR-34) e os genes do desenvolvimento embrionário even-skipped, hairy, fushi-tarazu transcriptor factor 1, actin5C, wingless, fruitless, Sex lethal interactor, TGF-ß activated kinase 1, zelda, Cdc42, GB54876, GB40540 para serem validadas pelo ensaio da luciferase em células em cultivo. O miR-34 foi escolhido por ser bastante conservado nas espécies de animais e por atuar em diversos processos do desenvolvimento, como a formação do sistema nervoso e o controle do ciclo celular. Além disso, os transcritos do miR-34 são depositadosmaternalmente nos ovócitos de D. melanogaster e D. rerio e neste último, o miR34 materno participa da neurogênese do embrião. Assim, a análise do transcriptoma do desenvolvimento embrionário de A. mellifera contribuiu para o conhecimento das moléculas expressas nesta fase, bem como para a identificação de novos miRNAs maduros. Como resultado da predição de sítios de miRNA, disponibilizamos uma base de dados com as interações putativas miRNA-alvo em A. mellifera e em D. melanogaster. Este trabalho também investigou, pela primeira vez, em abelhas, o papel de um miRNA na embriogênese ao validar interações entre o miR 34 e genes do desenvolvimento. Mostramos evidência experimental de que o miR34 regula os genes pair-rule even-skipped, hairy e fushi-tarazu transcriptor factor 1 e o gene estrutural actinSC; assim, contribuímos para o entendimento de um componente chave na cascata molecular da embriogênese de A. mellifera
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2014
- Data da defesa: 16.09.2014
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ABNT
FREITAS, Flávia Cristina de Paula. Análise do transcriptoma do desenvolvimento embrionário de Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) e a regulação dos genes eve, hairy, ftz-f1 e act5C pelo miR-34. 2014. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2014. . Acesso em: 29 mar. 2024. -
APA
Freitas, F. C. de P. (2014). Análise do transcriptoma do desenvolvimento embrionário de Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) e a regulação dos genes eve, hairy, ftz-f1 e act5C pelo miR-34 (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Freitas FC de P. Análise do transcriptoma do desenvolvimento embrionário de Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) e a regulação dos genes eve, hairy, ftz-f1 e act5C pelo miR-34. 2014 ;[citado 2024 mar. 29 ] -
Vancouver
Freitas FC de P. Análise do transcriptoma do desenvolvimento embrionário de Apis mellifera (Hymenoptera: Apidae) e a regulação dos genes eve, hairy, ftz-f1 e act5C pelo miR-34. 2014 ;[citado 2024 mar. 29 ]
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