Imunodiagnóstico da infecção por Strongyloides stercoralis em pacientes candidatos a transplante (2014)
- Authors:
- Autor USP: GOTTARDI, MAIARA - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MIP
- Subjects: ESTRONGILOIDÍASE; TESTES IMUNOLÓGICOS; TÉCNICA INDIRETA DE FLUORESCÊNCIA PARA ANTICORPO; STRONGYLIDA; IMUNOENSAIO; WESTERN BLOTTING
- Keywords: Ensaio de imunoadsorção enzimática; Enzyme linked immunosorbent assay; Estrongiloidíase; Immunodiagnosis; Indirect fluorescent antibody tecnique; Strongiloidiasis; Strongyloides stercoralis; Strongyloides stercoralis; Técnica indireta de fluorescência para anticorpo; Testes imunológicos; Western blotting; Western blotting
- Language: Português
- Abstract: A estrongiloidíase é uma infecção intestinal causada pelo nematódeo Strongyloides stercoralis. A maioria dos casos evolui para um quadro crônico benigno; entretanto pode haver hiperinfecção e disseminação, sobretudo em pacientes imunodeprimidos. Os métodos parasitológicos convencionais apresentam baixa sensibilidade e, com isso, os testes sorológicos podem representar uma boa alternativa para o diagnóstico dessa helmintíase. O presente trabalho tem como objetivo avaliar as técnicas de RIFI, ELISA e WB para o diagnóstico da estrongiloidíase em pacientes candidatos a transplante. Para validação dos testes, foram utilizadas amostras de soros de pacientes imunocompetentes (positivos para S. stercoralis, positivos para outras parasitoses e negativos). Foram utilizadas amostras de fezes e soros de pacientes candidatos a transplante, a saber: 50 para transplante renal; 50 para transplante de fígado; 50 para transplante de medula óssea. As amostras fecais de todos os pacientes foram analisadas pelas técnicas de sedimentação espontânea, Rugai, e cultura em placa de ágar. Para a execução das técnicas sorológicas foram utilizadas como fonte de antígeno larvas filarioides de S. venezuelensis. Para a RIFI, os soros foram diluídos a 1:40 em tampão PBS-TM e o conjugado anti-IgG humano marcado com fluoresceína diluído 1:500 em PBS acrescido de 4% de azul de Evans, sendo realizada a leitura em microscópio de imunofluorescência, utilizando as objetivas de 20X e 40X. Para a técnica ELISA foramutilizadas placas poliestireno sensibilizadas com 10?g de antígeno (frações solúveis salina e alcalina), soro dos indivíduos diluídos a 1:200 em PBS 0,05% Tween 3% de leite (PBS-TM) e conjugado (anti-IgG humana peroxidase) em PBS-TM. As amostras foram consideradas positivas quando o índice ELISA foi maior que 1. Para a técnica de WB, os soros foram diluídos 1:100 em Tris-HCl 5% de leite (TM) e o conjugado (anti IgG-humana peroxidase) em PBS-TM. Dos 150 pacientes candidatos a transplante analisados, 9,3% (n=14) foram positivos pelas técnicas parasitológicas, sendo que a cultura em placa de ágar detectou 6,6% (n=10). Na RIFI a soropositividade para detecção da infecção por S. stercoralis foi de 16,6% (n=25), sendo, 22% transplante renal, 18% hepático e 10% medula óssea. Pela técnica ELISA a soropositividade foi de 11,3% (n=17), sendo 14% nos pacientes candidatos a transplante renal, 14% hepático e 3% medula óssea, utilizando o antígeno alcalino, e 24,6% (n=37), sendo 18% nos pacientes candidatos a transplante renal, 50% hepático e 6% medula óssea, utilizando o antígeno salino. Pela técnica WB a soropositividade foi de 20,6% (n=31), sendo 18% nos pacientes candidatos a transplante renal, 32% hepático e 12% medula óssea, utilizando o antígeno alcalino, e 18,6% (n=28) sendo 10% nos pacientes candidatos a transplante renal, 14% hepático e 32% medula óssea, utilizando o antígeno salino. A utilização de técnicas imunodiagnósticas pode ser indicada na triagem de pacientes em fila detransplante, devendo-se levar em conta as limitações de reações sorológicas em pacientes imunodeprimidos
- Imprenta:
- Data da defesa: 14.10.2014
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ABNT
GOTTARDI, Maiara. Imunodiagnóstico da infecção por Strongyloides stercoralis em pacientes candidatos a transplante. 2014. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-09012015-162127/. Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Gottardi, M. (2014). Imunodiagnóstico da infecção por Strongyloides stercoralis em pacientes candidatos a transplante (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-09012015-162127/ -
NLM
Gottardi M. Imunodiagnóstico da infecção por Strongyloides stercoralis em pacientes candidatos a transplante [Internet]. 2014 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-09012015-162127/ -
Vancouver
Gottardi M. Imunodiagnóstico da infecção por Strongyloides stercoralis em pacientes candidatos a transplante [Internet]. 2014 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-09012015-162127/
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