Investigação de potenciais biomarcadores redox - um enfoque em aldeídos e seus produtos (2014)
- Authors:
- Autor USP: FREITAS, FLORÊNCIO PORTO - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: RADICAIS LIVRES; BIOMARCADORES; ESTRESSE OXIDATIVO; DNA (DANOS); ALDEÍDOS
- Language: Português
- Abstract: As espécies reativas são associadas a processos toxicológicos e fisiopatológicos, agindo como importantes mediadores, por exemplo, na sinalização celular. Diversas classes de compostos têm sido utilizadas como possíveis biomarcadores de estresse redox, destacando-se os aldeídos α,β-insaturados, capazes de alquilar biomoléculas como o DNA. Para evitar efeitos deletérios, estes aldeídos são detoxificados por glutationilação e posterior metabolização a derivados mercaptúricos. Contudo, avaliar o estado redox em sistemas biológicos ainda é tarefa bastante complexa, sendo a dificuldade em quantificar de forma prática e acurada os efeitos de sinalização e/ou dano molecular o maior problema dos estudos redox. Assim, o objetivo deste trabalho foi desenvolver métodos acurados e sensíveis de análise de potenciais biomarcadores de estresse redox, isto é: nucleosídeos modificados, aldeídos endógenos e exógenos, glutationa e produtos de glutationilação, e avaliá-los em sistemas modelos, celular e animal, e em humanos. A avaliação dos níveis urinários de três nucleosídeos modificados por metodologia de HPLC-MS/MS desenvolvida pelo grupo em moradores da cidade de São Paulo - região com poluição atmosférica - demonstrou aumento significativo de ‘1,N POT.2’-propanodGuo comparado aos moradores de região não poluída. Ademais, comprova-se pela primeira vez que células deficientes em reparo de ligações cruzadas apresentam níveis basais elevados de ‘1,N POT.2’-propanodGuo, em duas linhagens independentes, colocando este aduto como potencial mediador de carcinogênese em pacientes portadores de Anemia de Fanconi. Utilizando cérebro de ratos ‘SOD1 POT.G93A’ (modelo de Esclerose Lateral Amiotrófica - ELA), verificou-se aumento de 50% nos níveis de ‘1,N POT.2’-propanodGuo e de 100% nos de ‘1,N POT.6’-εdAdo em fase sintomática, sugerindo influência do conteúdolipídico cerebral, levando a comprometimento do metabolismo neuronal e morte celular. O perfil de aldeídos determinado em cérebro de ratos ‘SOD1 POT.G93A’ demonstrou aumento de trans-hexa-2-enal e trans,trans-hexa-2,4-dienal em fase assintomática e de trans,trans-deca-2,4-dienal em fase sintomática, não sendo observada nenhuma alteração na medula. Conhecer estas variações permite direcionar estudos de modificações em biomoléculas, além de a metodologia per se corroborar com as áreas de análises lipidômicas. Técnicas distintas e o preparo de amostras refletiram nos níveis de glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG) relatados. A técnica de espectrometria de massas mostrou-se mais precisa que a detecção eletroquímica; e a alquilação do grupo tiol minimizou interferências de matriz. Por análise de HPLC-UV/Vis-ESI-MS/MS, a quantificação de trans-4-hidroxi-2-nonenal (HNE) e crotonaldeido conjugados com GSH demonstrou não haver alterações em cérebro e medula de ratos ‘SOD1 POT.G93A’. Contudo, há formação esteroespecífica dos adutos de HNE in vivo. Ressalta-se que a metodologia desenvolvida é extremamente sensível e específica e permite análise simultânea de GSH, GSSG, cisteína, cistina e dos adutos supracitados, servindo para análise de outros adutos de glutationilação de aldeídos que possam ser importantes em doenças associadas a estresse redox
- Imprenta:
- Data da defesa: 23.05.2014
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ABNT
FREITAS, Florêncio Porto. Investigação de potenciais biomarcadores redox - um enfoque em aldeídos e seus produtos. 2014. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30092014-093431/. Acesso em: 30 set. 2024. -
APA
Freitas, F. P. (2014). Investigação de potenciais biomarcadores redox - um enfoque em aldeídos e seus produtos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30092014-093431/ -
NLM
Freitas FP. Investigação de potenciais biomarcadores redox - um enfoque em aldeídos e seus produtos [Internet]. 2014 ;[citado 2024 set. 30 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30092014-093431/ -
Vancouver
Freitas FP. Investigação de potenciais biomarcadores redox - um enfoque em aldeídos e seus produtos [Internet]. 2014 ;[citado 2024 set. 30 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30092014-093431/
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