Criação in vitro de xilanases estimuladas por D-xilose (2013)
- Authors:
- Autor USP: RIBEIRO, LUCAS FERREIRA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: PROTEÍNAS (ESTRUTURA); ENZIMAS (PRODUÇÃO); RECOMBINAÇÃO GENÉTICA
- Language: Português
- Abstract: O presente trabalho propôs o uso de uma nova abordagem de evolução dirigida, que permitiu a criação de proteínas alostéricas por recombinação "in vitro" de dois genes não homólogos. As técnicas aqui empregadas permitiram "evoluir" uma xilanase para que seja estimulada por D-xilose, sem a necessidade de alterar o sitio catalítico, o que diminui o risco de uma redução na atividade enzimática. A partir da criação de bibliotecas de inserção aleatória de domínio e de bibliotecas de linker-scanning analysis, pode-se posteriormente selecionar proteínas quiméricas com propriedades alostéricas. Foi adotado como modelo de estudo a endoxilanase A do Bacillus subtilis (XynA), uma enzima com aplicações industriais e com características mesoestáveis. A XynA foi fundida de forma randômica a uma proteína periplasmática de ligação a D-xilose (XBP), objetivando a criação de uma interface entre estes domínios. O que levou a uma modulação positiva na atividade xilanásica, em decorrência da ligação de D-xilose em XBP. A estratégia permitiu um estudo mais detalhado de mapearnento molecular o qual proporcionou uma plataforma interessante para explorar as bases estruturais sobre como evoluir propriedades como a modulação alostérica em enzimas com aplicações industriais
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2013
- Data da defesa: 13.12.2013
-
ABNT
RIBEIRO, Lucas Ferreira. Criação in vitro de xilanases estimuladas por D-xilose. 2013. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2013. . Acesso em: 16 abr. 2024. -
APA
Ribeiro, L. F. (2013). Criação in vitro de xilanases estimuladas por D-xilose (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Ribeiro LF. Criação in vitro de xilanases estimuladas por D-xilose. 2013 ;[citado 2024 abr. 16 ] -
Vancouver
Ribeiro LF. Criação in vitro de xilanases estimuladas por D-xilose. 2013 ;[citado 2024 abr. 16 ] - Desenvolvimento e caracterização de uma enzima quimérica bifuncional xilanase-lacase através de desenho racional
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