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A angiotensina II estimula a atividade do NHE3, ao menos em parte, por reduzir a atividade da PKA em células de túbulo proxima renal (2013)

  • Authors:
  • Autor USP: MALNIC, GERHARD - ICB
  • Unidade: ICB
  • Subjects: FISIOLOGIA; ANGIOTENSINA II; TUBULOS RENAIS PROXIMAIS; FISIOLOGIA RENAL
  • Language: Português
  • Abstract: A DOP aumentou os níveis de fosforilação do NHE3 das serinas 552 (64 ± 5 %) e 605 (389 ± 42 %) em relação ao controle. Quando a DOP foi incubada com Ang II por 15 e 30 min, este efeito sobre os níveis de fosforilação nos sítios consenso para PKA da região C-terminal do NHE3 foi abolido. Similarmente, a atividade da PKA foi aumentada nas células tratadas com DOP e nas células tratadas com DOP e Ang II por 5 min em comparação ao controle. A incubação das células por um maior tempo com Ang II, na presença de DOP, fez com que a atividade da PKA retornasse aos valores basais. Todos estes efeitos da Ang II foram prevenidos quando as células foram pré-tratadas com o bloqueador do receptor AT1 (losartan). Conclusão Conclui-se que um dos mecanismos pelos quais a Ang II estimula a atividade do NHE3 em túbulo proximal é por meio da inibição da atividade da PKA que leva à diminuição dos níveis de fosforilação endógena do NHE3, especialmente na serina 552.Resumo - Introdução A atividade da isoforma 3 do trocador Na+/H+ (NHE3) é aumentada por ação da angiotensina II (Ang II) em células de túbulos proximais. Os efeitos da Ang II em túbulos renais decorrem principalmente da ativação de receptores AT1. A ligação de Ang II a receptores AT1 pode resultar em inibição de adenilil ciclase via estimulação de proteína G inibitória. O NHE3 é inibido por fosforilação por proteína cinase A (PKA) e a redução nos níveis de AMPc, com consequente diminuição da atividade desta cinase, pode ser um dos mecanismos pelos quais o NHE3 é ativado por Ang II. Objetivos Este estudo tem como objetivo testar a hipótese de que a Ang II diminui os níveis de fosforilação endógena do NHE3 em sítios consenso para a PKA (serinas 552 e 605), aumentando a atividade deste transportador e, por conseguinte, a reabsorção de sódio em túbulo proximal renal. Código de Experimentação Animal Código de Experimentação Humana Métodos Células OKP foram tratadas com 100 µM Dopamina (DOP) por 30 min na presença ou na ausência de 10-10 M Ang II por 5, 15 e 30 min, apenas com Ang II por 30 min ou com veículo (controle). A função do NHE3 em células OKP foi feita por meio da recuperação do pH dependente de sódio após pulso ácido com cloreto de amônio. As análises por “immunoblotting” foram feitas para avaliar os níveis de fosforilação do NHE3 por PKA nas serinas 552 e 605 e para determinar a atividade da PKA. Resultados A DOP inibiu a atividade do NHE3 em relação ao controle (0,2013 ± 0,019 vs. 0,3036 ± 0,023 unidades pH/min). Quando a DOP foi incubada com Ang II por 15 (0,2347 ± 0,034 unidades pH/min) e 30 min (0,3295 ± 0,032 unidades pH/min), este efeito inibitório foi abolido. Conforme esperado, a Ang II estimulou a atividade do NHE3 (0,5075 ± 0,022 vs. 0,3036 ± 0,023 unidades pH/min).
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  • Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE)

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    • ABNT

      CRAJOINAS, R. O.; QUEIROZ-LEITE, G. D.; MALNIC, Gerhard; GIRARDI, A. C. C. A angiotensina II estimula a atividade do NHE3, ao menos em parte, por reduzir a atividade da PKA em células de túbulo proxima renal. Anais.. Caxambu: FeSBE, 2013.
    • APA

      Crajoinas, R. O., Queiroz-Leite, G. D., Malnic, G., & Girardi, A. C. C. (2013). A angiotensina II estimula a atividade do NHE3, ao menos em parte, por reduzir a atividade da PKA em células de túbulo proxima renal. In Resumos. Caxambu: FeSBE.
    • NLM

      Crajoinas RO, Queiroz-Leite GD, Malnic G, Girardi ACC. A angiotensina II estimula a atividade do NHE3, ao menos em parte, por reduzir a atividade da PKA em células de túbulo proxima renal. Resumos. 2013 ;
    • Vancouver

      Crajoinas RO, Queiroz-Leite GD, Malnic G, Girardi ACC. A angiotensina II estimula a atividade do NHE3, ao menos em parte, por reduzir a atividade da PKA em células de túbulo proxima renal. Resumos. 2013 ;


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