Análise do secretoma diferencial do fungo Trichoderrna reesei (Hypocrea jecorina) durante a formação de celuloses em presença de celulose, soforose e glicose (2014)
- Authors:
- Autor USP: PEDERSOLI, WELLINGTON RAMOS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: TRICHODERMA; PROTEÍNAS; ELETROFORESE; ENZIMAS HIDROLÍTICAS
- Language: Português
- Abstract: O fungo filamentoso Trichoderrna reesei (Hypocrea jecorina) produz um grande número de celulases e hemicelulases as quais agem despolimerizando uma grande variedade de polissacarideos naturais, dentre os quais a celulose. Assim estas enzimas hidrolíticas despertaram grande interesse na produção de bicombustivel pela sua degradação de componentes da biomassa. A transcrição da maioria dos componentes do complexo de celuloses é induzida não apenas por celulose, mas também por uma variedade de dissacarídeos incluindo a soforose e antagonizado por glicose, entretanto nem sempre o nível do transcrito reflete em quantidade de proteína secretada. Por este motivo, o presente trabalho utilizou de técnicas de proteômica como eletroforese 2-D fluorescente em gel diferencial (DIGE) e espectrometria de massa MALDI-TOF/MS comparando os secretomas de T. reesei obtidas nos cultivas de diferentes fontes de carbono como celulose, soforose e glicose. Atividades enzimáticas foram realizadas, como endoglicanase (CMCase) que demonstraram um perfil semelhantes no secretoma dos indutores celulose e soforose mas uma atividade menor no repressor glicose. Por outro lado, as atividades de ,ß-glicosidase e xilanases obtiveram altos níveis de atividade apenas no cultivo de 72 horas em celulose, indicando superioridade na indução destas hidrolases em relação às demais fontes de carbono. Na abordagem proteômica, a comparação entre as fontes de carbono celulose com glicose resultou na identificação de 36 proteínas extracelulares exclusivas do secretoma de celulose, entre elas as celuloses clássicas e proteínas não hidrolíticas como CIP1 e proteases. Na condição glicose das 28 identificadas, se destacaram proteínas como proteases, Epl1 e várias isoformas da álcool isoamil oxidase. Na comparação entre as fontes de carbono celulose com soforose, 31 e 20 proteína identificada, respectivamente, obteve uma altasimilaridade dos secretomas, entretanto foi detectado um grande número de proteínas não relacionadas com as funções de glicosil hidrolases na condição soforose. As análises de RT-qPCR demonstraram que as condições indutoras celulose e soforose obtiveram maior expressão nos genes de celuloses enquanto que a condição repressora glicose apresentou destaque na expressão dos genes da celulase CEL61A, CIP1 e a isoamyl álcool oxidase. Os resultados indicaram um alto nível de complexidade do mecanismo enzimático do fungo T. reesei em condições de indução e repressão
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2014
- Data da defesa: 07.02.2014
-
ABNT
PEDERSOLI, Wellington Ramos. Análise do secretoma diferencial do fungo Trichoderrna reesei (Hypocrea jecorina) durante a formação de celuloses em presença de celulose, soforose e glicose. 2014. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2014. . Acesso em: 06 out. 2024. -
APA
Pedersoli, W. R. (2014). Análise do secretoma diferencial do fungo Trichoderrna reesei (Hypocrea jecorina) durante a formação de celuloses em presença de celulose, soforose e glicose (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Pedersoli WR. Análise do secretoma diferencial do fungo Trichoderrna reesei (Hypocrea jecorina) durante a formação de celuloses em presença de celulose, soforose e glicose. 2014 ;[citado 2024 out. 06 ] -
Vancouver
Pedersoli WR. Análise do secretoma diferencial do fungo Trichoderrna reesei (Hypocrea jecorina) durante a formação de celuloses em presença de celulose, soforose e glicose. 2014 ;[citado 2024 out. 06 ] - Análise fosfoproteômica do fungo Trichoderma reesei durante a degradação do bagaço de cana de açúcar
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