Detecção quantitativa de milho transgênico por PCR em tempo real (2004)
- Authors:
- Autor USP: MUI, TSAI SIU - CENA
- Unidade: CENA
- Subjects: PLANTAS TRANSGÊNICAS; MILHO
- Language: Português
- Abstract: Utilizar métodos validados internacionalmente para detecção a níveis de maior precisão, de 1% para 0,1%, em milho transgênico na forma de farelos comparando-se dois métodos - PCR(Reação em Cadeia da Polimerase) e PCR em Tempo Real. Material e/ou métodos: Usou-se farelo de grãos de milho para obter os DNAs extraidos através do método de CTAB modificado. Os dois métodos - PCR e PCR em Tempo Real foram testados nas amostras, que continham 35S e cry1Ab (gene do Bacillus thurigiensis ), transgenes inseridos em milho geneticamente modificado.Testou-se também a invertase, presente em milho e usada como controle. As sequências de primers usados nas amplificações foram: invertase, promotor 35S, Cry1Ab:Cry03/Cry04 e IVS2-2/PAST-B. Resultados: No método CTAB foram incluidas duas lavagens com fenol aumentando a qualidade do DNA. Nas PCRs obteve-se resultados positivos nas amplificações do promotor 35S e invertase, confirmando transgenia e a presença de milho nas amostras. A PCR em Tempo Real apresentou grande sensibilidade quanto ao promotor 35S. Na fase atual estão sendo ajustadas as reações, afim de otimizar os primers para cry1Ab no uso da PCR em Tempo Real. Conclusões: Para uma boa PCR em Tempo Real é necessária uma boa qualidade de DNA, o que se conseguiu com a mudança no método do CTAB, barateando o processo uma vez que se evita o uso de Kits comerciais
- Imprenta:
- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP
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ABNT
BONONI, Daniele Cristine de Lima et al. Detecção quantitativa de milho transgênico por PCR em tempo real. 2004, Anais.. São Paulo: USP, 2004. Disponível em: https://uspdigital.usp.br/siicusp/cdOnlineTrabalhoObter?numeroInscricaoTrabalho=4238&numeroEdicao=12&print=S. Acesso em: 18 mar. 2026. -
APA
Bononi, D. C. de L., Gomes, J. E., Abrahão, O. S., & Tsai, S. M. (2004). Detecção quantitativa de milho transgênico por PCR em tempo real. In . São Paulo: USP. Recuperado de https://uspdigital.usp.br/siicusp/cdOnlineTrabalhoObter?numeroInscricaoTrabalho=4238&numeroEdicao=12&print=S -
NLM
Bononi DC de L, Gomes JE, Abrahão OS, Tsai SM. Detecção quantitativa de milho transgênico por PCR em tempo real [Internet]. 2004 ;[citado 2026 mar. 18 ] Available from: https://uspdigital.usp.br/siicusp/cdOnlineTrabalhoObter?numeroInscricaoTrabalho=4238&numeroEdicao=12&print=S -
Vancouver
Bononi DC de L, Gomes JE, Abrahão OS, Tsai SM. Detecção quantitativa de milho transgênico por PCR em tempo real [Internet]. 2004 ;[citado 2026 mar. 18 ] Available from: https://uspdigital.usp.br/siicusp/cdOnlineTrabalhoObter?numeroInscricaoTrabalho=4238&numeroEdicao=12&print=S - Estado nutricional e teor de glicosídeos cianogênicos em plantas de seringueira
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