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Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas (2013)

  • Authors:
  • Autor USP: ALVES, RAFAEL FERRAZ - EP
  • Unidade: EP
  • Sigla do Departamento: PQI
  • Subjects: VETORES (DESENVOLVIMENTO;CARACTERÍSTICAS); PROTEÍNAS; LIPOSSOMOS
  • Language: Português
  • Abstract: Um dos principais limitantes para o desenvolvimento de protocolos eficientes de terapia gênica e vacinação com DNA provém da baixa eficiência de transferência gênica por parte dos vetores não-virais. Isso surge, principalmente, pela dificuldade de transporte de DNA estrangeiro do exterior para o núcleo das células alvo, devido à presença de inúmeras barreiras físicas, enzimáticas e difusionais. O principal objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento, caracterização e avaliação de novos vetores não virais, formados por proteínas e lipídeos, capazes de realizar eficientemente a entrega de material genético (DNA plasmidial, pDNA) ao núcleo de células de mamífero. Para esse fim, complexos binários (CBs) foram formados combinando-se pDNA à protamina ou à proteína recombinante TRP3. Foi também estudado o encapsulamento destes CBs em lipossomas catiônicos, formados pelos lipídios EPC:DOPE:DOTAP, gerando então complexos pseudo-ternários (CPTs). Os estudos de tamanho de partícula e potencial zeta indicaram que ambas as proteínas são capazes de condensar pDNA e formar complexos (CBs e CPTs) pequenos (~100 nm) e de carga superficial positiva (+11,9 mV a +36,8 mV), adequados para a transfecção. No entanto, foram os CPTs contendo TRP3 que obtiveram os níveis mais elevados de transfecção (25,3%). Os ensaios de citotoxicidade mostraram que os CBs afetaram pouco a viabilidade celular, enquanto citotoxicidades mais elevadas foram observadas com o uso de CPTs. Finalmente, os resultados indicam que a TRP3 associada ao lipossoma (CPTs) aumenta a eficiência de entrega devido à alteração do tráfego intracelular, sugerindo um efeito sinérgico entre as diferentes moléculas do vetor na superação das várias barreiras encontradas no interior da célula.
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 24.10.2013
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      ALVES, Rafael Ferraz; AZZONI, Adriano Rodrigues. Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas. 2013.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2013. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/pt-br.php >.
    • APA

      Alves, R. F., & Azzoni, A. R. (2013). Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/pt-br.php
    • NLM

      Alves RF, Azzoni AR. Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas [Internet]. 2013 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/pt-br.php
    • Vancouver

      Alves RF, Azzoni AR. Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas [Internet]. 2013 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/pt-br.php


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