Análise de marcadores de células-tronco/progenitoras em hipófises de modelos animais com hipopituitarismo (2013)
- Authors:
- Autor USP: CHANG, CLAUDIA VEIGA - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MCM
- Subjects: CÉLULAS-TRONCO; GLÂNDULA PITUITÁRIA; CAMUNDONGOS; IMUNOHISTOQUÍMICA; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE
- Keywords: Camundongos mutantes/crescimento e desenvolvimento; Camundongos transgênicos/crescimento e desenvolvimento; Células-tronco; Células-tronco pluripotentes; Fatores de transcrição SOX; Fatores de transcrição SOXB1; Hipófise/crescimento e desenvolvimento; Hipopituitarismo/congênito; Hypopituitarism/congenital; Immunohistochemistry; Imunoistoquímica; Mice, mutant strains/growth and development; Mice, transgenic/growth and development; Modelos animais; Models, animal; Nicho de células-tronco; Pituitary gland/growth and development; Pluripotent stem cells; Reação em cadeia da polimerase em tempo real; Real-time polymerase chain reaction; Sox transcription factors; SOXB1 transcription factors; Stem cell niche; Stem cells
- Language: Português
- Abstract: Introdução: As células-tronco apresentam capacidade de proliferação, autorrenovação, potencial de diferenciação e já foram descritas na hipófise estando envolvidas na renovação celular e regulação homeostática, porém pouco se sabe sobre o seu perfil de expressão nos quadros de hipopituitarismo. Dentre os marcadores de células-tronco descritos previamente na hipófise, destacam-se os genes Sox2, Nanog, Nestina, Cd44 e Oct4. Outro marcador, o gene Nr2e1 (Tlx), encontrado em células-tronco neuronais, apresenta-se elevado durante a embriogênese e na vida adulta no cérebro de camundongos, mas, até o momento, não foi caracterizado na hipófise. Objetivo: Analisar a imunolocalização do SOX2 e o padrão de expressão de marcadores de células-tronco/progenitoras, fatores de transcrição precoce, marcadores de apoptose e proliferação celular na hipófise de três linhagens de camundongos com hipopituitarismo de causa genética por alteração em fatores precoces de diferenciação glandular, as linhagens Ames (Prop1) e Snell (Pou1f1), e por fator tardio de conjugação dos hormônios glicoproteicos, a linhagem alfaGSU, nocaute do gene Cga. Material e Métodos: Foram coletadas hipófises nos tempos P0 (ao nascimento), P7 (final da primeira onda de crescimento glandular), 4 semanas (4S-período da puberdade) e 8 semanas (8S-vida adulta).Nas três linhagens de animais, realizou-se imuno-histoquímica com SOX2 e RT-qPCR com os marcadores de células-tronco/progenitoras Sox2, Nanog, Nestina, Cd44, Oct4 e Nr2e1, fatores de transcrição precoces (Hesx1, Hes1 e Otx2), fator de proliferação celular (Ki67), fatores de diferenciação celular (S100beta e Sox9) e marcadores de apoptose (Caspases 3 e 7). A quantificação relativa dos genes-alvo nos animais mutantes teve como calibrador os seus respectivos selvagens. Resultados: A imunolocalização do SOX2 foi observada na zona que circunda a fenda de Rathke (camada marginal) e em nichos difusos pela glândula nas três linhagens estudadas. Na linhagem alfaGSU, evidenciou-se uma redução de Nanog, Nr2e1, Oct4, e Hesx1 em 4S e de Nestina em 8S. Na linhagem Snell, observou-se aumento na expressão de Sox2, Nanog, Cd44, Nr2e1, Hesx1, Hes1, Otx2, S100beta e Sox9 em 4S e aumento de Sox2, Cd44, Hesx1, Otx2 e Sox9 em 8S, associado à redução de Ki67 em ambos os períodos. Na linhagem Ames, evidenciou-se aumento de Sox2, Nanog, Cd44, Hesx1, Hes1, Otx2, S100beta e Sox9 em 4S e 8S. O gene Nr2e1 esteve hiperexpresso em todos os tempos. Houve redução do Ki67 em 4S. As caspases 3 e 7 não se apresentaram alteradas em nenhuma linhagem e/ou tempo. Discussão e conclusão: O padrão de imunolocalização de SOX2 encontrado nas três linhagens estudadas foi semelhante ao descrito em animais sem hipopituitarismo. A evidência da presença do Nr2e1 o coloca como um novo marcador de células-tronco/progenitoras na hipófise.A expressão elevada dos marcadores de células-tronco/progenitoras nas linhagens Ames e Snell sugere que a ausência dos fatores de transcrição precoces não permitiria que a célula tronco/progenitora iniciasse o processo de diferenciação celular, enquanto o oposto ocorreria na linhagem alfaGSU. Adicionalmente, estes achados justificam a hipoplasia hipofisária observada em animais com defeitos em fatores de transcrição expressos no início da diferenciação hipofisária, nos quais o acúmulo de células-tronco pode ser um indicador da indiferenciação hipofisária
- Imprenta:
- Data da defesa: 13.11.2013
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ABNT
CHANG, Claudia Veiga. Análise de marcadores de células-tronco/progenitoras em hipófises de modelos animais com hipopituitarismo. 2013. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2013. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5135/tde-03122013-115816/. Acesso em: 09 fev. 2026. -
APA
Chang, C. V. (2013). Análise de marcadores de células-tronco/progenitoras em hipófises de modelos animais com hipopituitarismo (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5135/tde-03122013-115816/ -
NLM
Chang CV. Análise de marcadores de células-tronco/progenitoras em hipófises de modelos animais com hipopituitarismo [Internet]. 2013 ;[citado 2026 fev. 09 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5135/tde-03122013-115816/ -
Vancouver
Chang CV. Análise de marcadores de células-tronco/progenitoras em hipófises de modelos animais com hipopituitarismo [Internet]. 2013 ;[citado 2026 fev. 09 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5135/tde-03122013-115816/
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