Tese

Caracterização biológica da crotamina nativa e de seu fragmento RWRWK, um potencial sítio de ligação ao DNA (2013)

• Authors:
  • Vieira, Lara França
  • Oliveira, Eduardo Brandit de (Orientador)
• Autor USP: VIEIRA, LARA FRANÇA - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RBI
• Subjects: SERPENTES; VENENOS DE ORIGEM ANIMAL; CROTALIDAE; ENZIMAS (ISOLAMENTO E PURIFICAÇÃO)
• Language: Português
• Abstract: A crotamina é uma miotoxina proveniente da peçonha da serpente Crotalus durissus terrificas, particularmente rica em lisinas, cujos 42 resíduos de aminoácidos se enovela^In em uma compacta estrutura composta de uma pequena a-hélice N-terminal formada pelos resíduos 1-7 e duas folhas- formadas pelos resíduos 9-12 e 34-38. Esta toxina é capaz de induzir proteólise intramuscular tanto em músculo soleus quanto em músculo extensor digitorum longus (EDL) de ratos, porém o papel da crotamina neste processo ainda é incerto. A crotamina apresenta características semelhantes aos peptídeos penetradores de células (PPCs) em sua estrutura, como a presença de 11 resíduos carregados positivamente (9 lisinas e 2 argininas) e tamanho reduzido. Ela é capaz de formar complexos com DNA plasmidial e entregar esse material com sucesso para uma grande variedade de células em um organismo vivo. Utilizando diferentes estratégias, tais como produção de anticorpos específicos contra a crotamina, imunohistoquímica e análise de componentes conhecidamente envolvidos nos processos de proteólise intracelular, obtivemos evidências de que a crotarriina está presente no tecido muscular esquelético e que a proteólise intracelular induzida por esta toxina é medrada pela modulação dos componentes do sistema ubiquitina-proteassoma ATP-dependente e pela via Cálcio-dependente, sendo que em músculos compostos por fibras brancas do tipo II (EDL) a participação do sistema ubiquitina-proteassoma parece ser mais intensa e, em músculo compostos por fibras vermelhas do tipo I (soleus) a via Cálcio-dependente mostra uma maior ativação. Através da síntese química do peptídeo fluorescente FITC- AHX - R-W-R-W-K-LNH2 e experimentas de irnunocitoquímica, concluímos também que a região da crotamina que compreende os aminoácidos 31-35 tem potencial para atuar como um PPC, pois o peptídeo sintetizado foi internalizadopor ambas as linhagens celulares analisadas (HeLa e HEK 293T). Além disso, o peptídeo fluorescente apresenta uma localização subcelular diferente da observada para a crotamina íntegra, estando ausente do núcleo e dos lisossomos. Porém, sua localização subcelular exata permanece desconhecida. O peptídeo demonstrou efeito citotóxico, principalmente sobre células HeLa
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 2013
• Data da defesa: 16.08.2013

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How to cite

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• ABNT

  VIEIRA, Lara França. Caracterização biológica da crotamina nativa e de seu fragmento RWRWK, um potencial sítio de ligação ao DNA. 2013. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2013. . Acesso em: 25 set. 2024.

• APA

  Vieira, L. F. (2013). Caracterização biológica da crotamina nativa e de seu fragmento RWRWK, um potencial sítio de ligação ao DNA (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.

• NLM

  Vieira LF. Caracterização biológica da crotamina nativa e de seu fragmento RWRWK, um potencial sítio de ligação ao DNA. 2013 ;[citado 2024 set. 25 ]

• Vancouver

  Vieira LF. Caracterização biológica da crotamina nativa e de seu fragmento RWRWK, um potencial sítio de ligação ao DNA. 2013 ;[citado 2024 set. 25 ]

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